OsAUX4::GUS载体构建及转化水稻开题报告

 2020-02-10 10:02

1. 研究目的与意义(文献综述)

生长素在植物整个生命历程中发挥重要的作用,影响植物细胞分裂,细胞伸长和细胞分化,进而影响根和茎的发育和生长,维管束组织的形成和分化,器官的衰老等生长发育过程[1],对高等植物细胞和组织最终的形状和功能具有重要作用[2]。

生长素在植物体各个器官中都有分布,但是,它在植物体内的差别分布调节着植物的生长以及对环境的适应。

例如植物的向性生长,向光性和向重力性,都是因为外界环境改变了植物体内生长素的浓度分布,从而导致不同的组织器官生长发育的速度不同。

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2. 研究的基本内容与方案

研究的基本内容:
构建了osaux4基因的启动子融合gus报告基因的重组载体,并通过农杆菌介导的转基因方法转入到水稻愈伤组织中。

为研究osaux4基因在水稻中的表达模式提供材料。


研究的目标:
1) 根据基因的序列,设计引物,并扩增出目的启动子片段
2) 成功连接启动子片段和t载体并选取阳性菌落验证
3) 成功转入终载体中并转化感受态细胞选取阳性菌落验证
4) 成功的将水稻osaux4基因启动子与gus基因重组载体转入水稻植株,并筛选到了转基因植株。

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3. 研究计划与安排

第1-2周:查找相关资料,翻译外文文献初步收集论文的基本资料,根据论文题目确定实验具体方案,所需的实验器材,撰写开题报告。


第3-4周:准备好实验器材,准备实验所用的试剂,学习并设计引物,做好实验前的准备,方便顺利开展实验。


第5-6周:准备水稻培养液,并进行水稻培养和进行水稻成熟胚的诱导。

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4. 参考文献(12篇以上)

[1] 吕剑, 喻景权. 植物生长素的作用机制[J]. 植物生理学报, 2016, 40(05).
[2]Ljung, K. Auxin metabolism and homeostasis during plant development[J]. Development, 2013, 140(5):943-950.
[3]Vanneste S,Friml J.Auxin:A Trigger for Change in Plant Development.Cell ,2009,136:1005—1016.
[4]Kramer E.M. amp; Bennett M.J. Auxin transport: a field in flux. Trends Plant Sci, 2006,11, 382-386
[5]俞晨良, 董文其, 张成浩. 生长素运输载体研究进展[J]. 延边大学农学学报, 2016(4).
[6]Shen C J, Bai Y H, Wang S K, et al. Expression profile of PIN, AUX/LAX and PGP auxin transporter gene families in Sorghum bicolor under phytohormone and abiotic stress[J]. The FEBS journal, 2010, 277(14): 2954-2969.
[7]俞晨良. OsAUX/LAX家族表达模式及OsAUX1在水稻根系发育中的功能研究[D].浙江大学,2015.
[8]Swarup R , Péret, Benjamin. AUX/LAX family of auxin influx carriers—an overview[J]. Frontiers in Plant Science, 2012, 3(225):225.
[9]Laplaze L., Murphy A., Bennett M.J., Nielsen E. amp; Swarup R. AUX/LAX genes encode a family of auxin influx transporters that perform distinct functions during Arabidopsis development. Plant Cell,2012, 24, 2874-2885.
[10]Zhao H, Ma T, Wang X, et al. OsAUX1 controls lateral root initiation in rice (Oryza sativa L.)[J]. Plant Cell amp; Environment, 2015, 38(11):2208-2222.
[11]Giri J , Bhosale R , Huang G , et al. Rice auxin influx carrier OsAUX1 facilitates root hair elongation in response to low external phosphate[J]. Nature Communications, 2018, 9(1):1408.
[12]Wang M, Qiao JY, Yu CL, et al. The auxin influx carrier, OsAUX3, regulates rice root development and responses to aluminium stress[J]. Plant Cell Environ. 2018;1–14
[13]Yu C L , Sun C D , Shen C , et al. The auxin transporter, OsAUX1, is involved in primary root and root hair elongation and in Cd stress responses in rice ( , Oryza?sativa , L.)[J]. The Plant Journal, 2015, 83(5):818-830.
[14] He Q, Fu X, Shi P, et al. Glandular trichome-specific expression of alcohol dehydrogenase 1 (ADH1) using a promoter-GUS fusion in Artemisia annua L[J]. Plant Cell, Tissue and Organ Culture (PCTOC), 2017, 130(1): 61-72.
[15]细胞分裂素对OsAUX1调控水稻根系发育的影响[D]. 浙江大学, 2016.
[16]蔡薇, 支添添, 任春梅. 拟南芥HGO基因启动子与GUS融合表达载体的构建及转化鉴定[J]. 作物研究, 2017(3).

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