羟基化酶克隆表达与性质研究开题报告
2020-04-16 04:04
1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)
1.1课题简介: 现如今,人们对食品安全,营养日益重视,食品已不仅仅是满足人们生存的基本需求品,食品行业的发展越来越迅速,相关食品的技术也日新月异地发展着,酶作为一种高效催化剂对食品的影响是很重要的。
四氢嘧啶和5-羟化四氢嘧啶作为相容性物质,不仅可以调节渗透压,还可以稳定蛋白结构,在医药、生物制造和化工行业具有广阔的发展前景,但5-羟化四氢嘧啶作为渗透压保护剂及对蛋白的保护作用要优于四氢嘧啶和其他相溶性物质。
四氢嘧啶羟化酶(ectd)属于fe 2 与2-酮戊二酸依赖型双加氧酶超家族,ectd在催化反应中体现作用底物的专一性,主要催化四氢嘧啶生成5-羟化四氢嘧啶,是微生物发酵生产5-羟化四氢嘧啶过程中的关键酶,因此四氢嘧啶羟化酶和5-羟化四氢嘧啶都已受到广泛关注。
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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
一、要研究的问题 本课题将从需盐色盐杆菌中调取四氢嘧啶羟化酶(ectd)的基因片段,并对其进行克隆表达同时对该性质研究进行综合分析和研究,对四氢嘧啶羟化酶酶学性质最适条件如:盐浓度、ph、温度等进行优化,并对金属离子的耐受性、耐盐性、ph耐受性以及温度稳定性等耐受性进行考察。
二、研究手段 (1)从ncbi中提取需盐色盐杆菌中ectd的碱基序列,然后进行序列分析对比。
(2)提取菌体中的该ectd基因片段,在大肠中进行克隆表达。
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