用于分析茶中农药残留的GC-MS方法的评估和实验室间的验证

C. F. PENG, H. KUANG, X. Q. LI, and C. L. XU*

School of Food Science and Technology, Southern Yangtze University, 214036 WuXi, JiangSu Province, China e-mail: xcl@sytu.edu.cn

Received 15 June 2006; Revised 30 July 2006; Accepted 4 September 2006

摘要：描述了一种通过气相色谱 - 质谱选择离子监测同时测定9种有机杂环农药残留的方法。我们用丙酮 - 己烷混合物萃取, 石墨化碳和中性Al₂ O ₃柱纯化后,这9种化合物:阿特拉津，乙烯唑啉，腐霉利，氟菌唑，灭草脲，噻嗪酮，丙环唑，氯苯嘧啶醇和哒螨酮被各自分离出来，然后用GC-MS测定，最后用外标法定量。研究发现在0.01～30 mg·kg^-1的加标水平下，农药的回收率在73％～116％之间，相对标准偏差在3％～27％之间。此外，测定范围（0.01 mg kg-1～5.0 mg· kg^-1）和线性范围（0.02～40ug·mL^-1）说明，同时测定中国茶叶中的多残留物（如乌龙茶，绿茶，红茶等）是可能的。此外，还在5个实验室之间进行了实验室间的研究，以进一步验证该方法，结果令人满意。

关键词：茶叶; 农药; 分析; GC-MS; 选择离子监测

1.简介

常用的测定有机杂环农药残留物的方法有气相色谱 - 电子捕获检测器（GC-ECD）和气相色谱 - 硝基磷检测器（GC-NPD）^[1-3]。 为了确定农药残留，现在，质谱检测器逐渐被认为是一种对选择离子监测（SIM）模式的电流检测器，对于检测不同类型的农药化合物具有高度敏感性，但是目前用GC-MS测定茶叶中农药多残留的相关研究报道较少，尽管用此法检测水果或蔬菜的研究报道很多^[4-14]。

茶是一种植物，其组分复杂，亲脂性丰富。由于采用了特殊的加工工艺，茶叶细胞容易被破坏，内含物也会流出并散布在叶面上，因此在提取时容易流入有机溶剂中，尽管已有多种方法被报道，但传统茶叶样品处理仍存在或多或少的不足，如萃取机制不理想，有机试剂昂贵，取样步骤繁琐^{[2-4,15 ]}。本研究的目的是优化提取和净化程序，并在MS模式下对9种常用于中国茶叶种植的多种有机杂环农药残留物进行同时分析。建议使用的GC-MS-SIM方法快速，灵敏，准确，并且在实际应用中可行，可以满足食品添加剂质量控制的规范和标准^[16]。

2.实验部分

2.1试剂和材料

使用分析级丙酮，己烷和甲醇（北京化学公司，北京，中国）制备丙酮 - 己烷（phi;r= 1：3和phi;r= 1：2）和丙酮 - 己烷 - 甲醇（phi;r= 1：3：0.5）溶液。 无水硫酸钠从Baker（Deventer，The Netherlands）获得并在使用前在300℃进一步纯化20小时。使用蒸馏水和去离子水制备的4%NaCl溶液。

* MS谱中含量最高的m / z离子。

对于实验，使用纯度优于98％的标准农药样品 农药标准溶液（1.00 mg·mL^-1）通过精确称量并溶解在丙酮中进行预先配制，并储存在冰箱（-3℃）中。相应的标准工作溶液通过用己烷适当稀释制备并储存在冰箱（4℃）中。

2.2 样品制备

精确称量1g均质中国绿茶样品（plusmn;0.001g）并转移至15mL离心管中。加入1g氯化钠和2ml蒸馏水后，将试管振荡30s。使混合物静置30min，与4mL丙酮 - 己烷（phi;r= 1：3）溶液混合，再次振荡2min并在2500r·min^-1离心机中离心1min。将上层己烷溶液转移到15mL容量瓶中，用2mL丙酮和己烷的混合溶液（phi;r= 1：3）萃取两次。将两个前提放在一起并用1g无水硫酸钠干燥。将干燥的提取物定量转移至干净的试管中，并在微量样品处理仪器中在氮气流下于50℃蒸发至约1mL。

使用装有石墨化炭（用1cm厚无水硫酸钠层）和中性Al2O3固相萃取柱，固相萃取柱的真空过滤罐用于固相萃取（SPE）。使用3times;1mL丙酮和3times;1mL己烷（流速0.5mL min-1）活化两个柱。将浓缩干燥的提取物通过真空过滤罐后，用6.0mL丙酮 - 己烷溶液（phi;r= 1：2）冲洗滤筒。收集的洗脱液在氮气流50℃下蒸发至干燥。最后，将溶液用己烷稀释至0.5mL的恒定体积用于GC-MS分析。

2.3 GC-MS分析

气相色谱仪（HP-5890 series II，Hewlett- Packard，Palo Alto，CA，USA）装配熔融二氧化硅Ultra 2毛细管柱（DB-5，交联的5％苯基 - 和95％甲基硅氧烷，30m 内径为0.20mm，膜厚为0.25mu;m），自动取样器（HP-7673），不分流进样器和HP-5971质量选择检测器。

色谱分析始于70℃的烘箱温度，在此温度保持2min。然后，温度以8℃·min-1的加热速率增加到180℃，并以3℃·min-1增加到280℃。然后，烘箱温度保持180℃。注射器温度为250℃，氦气（纯度ge;99.995％）用作载气0.6 mL·min-1。 1uL样品以无分流模式注入，1min后打开阀门。质量检测器被设置为电子轰击（70 eV）模式，离子源和界面温度分别为180℃和280℃。以15min溶剂延迟的SIM模式进行分析。表1中列出了农药残留的保留时间和监测离子（m / z）。

根据加标样品溶液中9种有机杂环类农药的含量，考虑到色谱图中的峰面积，选择相应的标准工作溶液。标准工作溶液和加标样品溶液的响应值按照线性响应的范围进行排列。为了测定农药含量，始终注入相同体积的相应标准加样和加标样品溶液。

表2. 5次重复测定农药含量的回收率，精确度和测定限度