斑马鱼肌肉兴奋传递调节变化对束丝藻毒素的响应开题报告
2020-02-10 11:02
1. 研究目的与意义（文献综述）
1.1 研究背景：
随着我国工业的飞速发展和人类对自然环境的保护观念不强，许多外源污染物被排放至中国滇池，使得滇池水富营养化，从而导致滇池内的蓝藻水华暴发肆虐。水华束丝藻是蓝藻水华中的优势种群之一，水华束丝藻是一种在世界性富营养化水体中快速繁殖的有毒丝状蓝藻，能产生束丝藻毒素即麻痹性贝类神经毒素（psps），导致滇池中的滤食性鱼类大量死亡，对人类的健康和环境安全构成了巨大的威胁。麻痹性贝类毒素属于神经毒素，是一种广泛存在于海洋甲藻、淡水蓝藻甚至是细菌里的生物碱性神经毒素，具有水溶性。束丝藻毒素主要存在于淡水系统中，在水中能累积到一个很高的水平，可以通过食物链从甲藻、蓝藻逐级积累到海贝、贻贝等动物体内，且该神经毒素具有很强的耐性，如耐酸性和耐高温性，用普通烹调方法不能完全去除污染该毒素食品中的毒性，因而处在食物链顶端的人类发病率和死亡率最高。目前，仍然没有有效的方法治疗束丝藻毒素引起的中毒。因此生活在含有束丝藻毒素的水体中的水生生物可能面临着这种毒素的威胁，甲藻和淡水丝状蓝藻产生的毒素可能会危害生态系统和人类健康。
早在2004年，国内开始等便通过腹腔注射法检测到滇池水华产生的束丝藻毒素对小鼠有毒害作用，这是中国对滇池束丝藻毒素的首次报道。在这之前，国外几个国家也有关于束丝藻水华产生具有长期毒性的麻痹性贝类神经毒素的研究报道。由于斑马鱼是模式生物，其在生理学和解剖学上和其他脊椎动物包括人类都是同源的，斑马鱼的脑与其它脊椎动物包括人类的脑的功能也有相似性，因此，实验中常用斑马鱼作为模式生物来研究具有复杂机能的高等脊椎动物包括哺乳动物的功能。
2. 研究的基本内容与方案
2.1 研究内容：
本文以滇池水华期间采集分离的水华束丝藻为材料，藻株经实验室培养、细胞内毒素抽提和纯化，毒素含量和成分分析后，通过腹腔注射（5.3 and 7.61mg stxeq/kgbw作为低浓度和高浓度）对斑马鱼进行毒素处理，在染毒后的24小时内的不同时间点（1,3,6,9,12 和24h）取斑马鱼肌肉组织，对斑马鱼肌肉组织的肌肉特异性酪氨酸受体激酶（muscle-specific receptor kinase，musk)）、低密度脂蛋白受体相关蛋白4(low-density lipoprotein receptor-related protein 4, lrp4)、调节蛋白激酶7(dok-7)、乙酰胆碱受体相关蛋白(rapsyn)、原肌球蛋白相关激酶 (tropomyosin-related kinase, trk)等肌肉兴奋传递关键酶活性变化进行研究。
2.2研究目标：
3. 研究计划与安排
第1周：资料查找，筛选，阅读，讨论和立论
第2周：阅读并撰写出国内外相关研究内容的总结和概况，并同时将1篇与论文主题相关的英文参考文献翻译成中文
第3周：确定研究思路，设计研究方法，方案定稿
4. 参考文献（12篇以上）
[1] 方瑗，张洪，梅元武，等 亚低温持续不同时间对缺血鳃组织中氨基酸和单胺类递质含量的影响. 中国神经免疫学和神经病学杂志，2004,11（4）:213-217
[2] rico e.p.，rosemberg d.b.，seibt k.j.，et al. zebrafish neurotransmitter systems as potential pharmacological and toxicological targets. neurotoxicology and teratology ，2011，33：608–617.
[3]马丽玲，张万山，沈玲华大鼠神经肌肉接点! 型乙酰胆碱受体密度测定的elisa法.井冈山医专学报，2004,11（6）:65-67
