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顺式-4-脯氨酸羟化酶的克隆表达和酶学性质的研究开题报告

 2020-05-02 06:05  

1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)

文 献 综 述 1羟脯氨酸 l-羟脯氨酸(l-hydproline,l-hyp)为亚氨酸,不属于20种常见氨基酸,是l-脯氨酸羟基化修饰后的产物,分子式为 c5h9no3,根据羟基化修饰位置不同,分为3-l-羟脯氨酸和4-l-羟脯氨酸,且l-羟脯氨酸有两个非对称性碳原子,因此l-羟脯氨酸具有4种同分异构体:顺式-3-l-羟脯氨酸、顺式-4-l-羟脯氨酸、反式-3-l-羟脯氨酸和反式-4-l-羟脯氨酸[1-2]。

l-羟脯氨酸呈白色片状晶体或晶体粉末,微甜,易溶于水微溶于乙醇,熔点为274#176;c。

其中顺式-4-l-脯氨酸是一种具有独特的生理活性的氨基酸,它是构成哺乳动物骨胶原蛋白的重要组成成分[3],同时也是构成肝和胆囊的重要成分,具有独特的生物活性和很多重要的生物活性。

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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

选择来自苜蓿中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)中的顺式-脯氨酸-4-羟化酶基因(SmP4H),并对其进行克隆表达,诱导发酵后纯化重组蛋白,考察其动力学参数、最适温度和温度的稳定性,最适pH值以及和pH值的稳定性、金属离子的影响等。

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