豇豆、鸡腿菇、金针菇、韭黄的抗氧化活性研究
2024-01-16 08:01
论文总字数：6568字
摘 要
目的:测定豇豆、金针菇、鸡腿菇、韭黄这四种蔬菜分别用水、50%乙醇、乙醇、50%丙酮、丙酮提取的抗氧化活性。方法：利用DPPH·法测定四种蔬菜的抗氧化活性，并且分析了抗氧化活性和提取液的关系。结果表明：所测蔬菜中抗氧化活性最强的为豇豆，最弱的为鸡腿菇,5种提取液中50%丙酮更能有效的将果蔬中的抗氧化活性成分提取出来。结论：不同的溶剂测出的抗氧化活性的大小不同，蔬菜中的抗氧化活性成分值得进一步研究。关键词：豇豆，鸡腿菇，金针菇，韭黄，DPPH，自由基清除率，抗氧化性
Abstract: Objective: Antioxidants of cowpea, mushroom, coprinus and chives were extracted in distilled water, 50% ethanol, ethanol, 50% acetone and acetone. Methods: The DPPH· method were used to measure the antioxidant activities of four vegetables. The results suggested that the cowpea is the strongest and coprinus is the weakest in antioxidant activity among the four vegetables. 50% ethanol can effectively extracted antioxidants from vegetables. Conclusion: some vegetables possess strong antioxidant activities and are worth studying further.
Keyword: cowpea, mushroom, coprinus, chives, DPPH, radical scavenging, antioxidant
目录
1 前言 6
2 材料与方法 6
2.1材料 7
2.2试剂 7
2.3仪器 7
2.4实验方法 7
2.4.1 样品的预处理 7
2.4.2 DPPH·溶液配制 7
2.4.3 样品溶液的制备 7
2.4.4样品溶液提取条件 7
2.4.5提取物的获取 7
2.4.6提取物溶液的制备 8
2.4.7抗氧化性的测定 8
3.结果与讨论 8
3.1豇豆的5种溶剂提取物的DPPH·清除率 8
3.2金针菇的5种溶剂提取物的DPPH·清除率 9
3.3鸡腿菇的5种溶剂提取物的DPPH·清除率 9
3.4韭黄的5种溶剂提取物的DPPH·清除率 10
3.5 四种蔬菜对DPPH清除作用比较 11
结论 12
参 考 文 献 13
致 谢 14
1 前言
蔬菜是百姓生活中不可缺少的，在人的饮食习惯中有着非常重要的地位，它不单单是食物，是人体所需的营养维生素、矿物质、纤维的主要来源，同时还能预防和治疗某些疾病。从蔬菜中获取抗氧化物质即便宜又健康[1]。
研究表明，自由基和人体许多疾病和疾病的发生有着密切的联系。因此，研究自由基的检测方法和探讨物质对自由基的清除作用具有一定的意义。DPPH·法是一种迅速、简单、方便、灵敏的方法用以评价天然抗氧化剂抗氧化活性。DPPH·分析法被广泛用于清除自由基物质性质的研究，DPPH是一种以氮为中心的稳定的自由基，其孤对的电子在517 nm附近具有最大吸收在醇溶液中显深紫色。当有机清除剂存在时，孤对电子被配对，吸收消失或减弱，通过测定吸收减弱的程度，可评价自由基清除剂的活性[2]。近年来对各种蔬菜的抗氧化活性的研究比较多，但他们使用的方法和结果不尽一致。经过网上查阅与搜集，发现豇豆、金针菇、鸡腿菇以及韭黄这四种食物含有较丰富的营养成分，但是对其抗氧化性的研究较少。
豇豆(Vigna sinensis) 又名豆角、长豆角、带豆、裙带头等，为豆科蝶形花亚科豇豆属一年生缠绕草本植物。豇豆具有很好的营养价值，向来有补气养肾之功效，是用来食疗的上等食物[3]。据化学研究表明，豇豆含蛋白质、脂肪、维生素C、维生素B、钙、磷和铁等诸多有益成分，豇豆还是一些高危病病人的理想保健食物。豇豆中的维生素C就是一种很好的抗氧化剂[4]。
金针菇（Needle mushroom）学名毛柄金钱菌毛脚伞菌，因其菌柄细长似金针菜，属担子菌纲伞菌目白蘑科金钱真菌，且具有很高的药用食疗作用[5]。
鸡腿菇（Coprinus comatus）学名毛头鬼伞，隶属鬼伞科、鬼伞属。鸡腿菇的肉质很嫩，味道十分鲜美，营养价值颇高。其不寒不燥，有益脾胃，具有安神的功效，长期食用可以帮助消化食物。据研究表明，鸡腿菇具有降低血糖、增强人体免疫力、抑制细菌等功效[6]。
韭黄（Yellowish Leek）属百合科多年生草本植物，其种子和叶可以入药。具健胃、提神、补肾助阳、固精等功效。韭黄是韭菜在特定的环境条件下生长出来的颜色呈金黄或者黄白色的一种蔬菜。它纤维含量少、肉质细嫩、口感清淡又不失韭菜的香味，有很高的经济价值和营养价值[7]。
本实验以豇豆、金针菇、鸡腿菇、韭黄四种蔬菜为实验材料进行研究，以不同溶剂对其进行提前获得提取物采取DPPH·法对四种蔬菜的抗氧化活性进行比较，并对数据进行分析。
2 材料与方法
2.1材料
新鲜豇豆、金针菇、鸡腿菇、韭黄，从长江路菜市场购买。
2.2试剂
甲醇、无水乙醇、丙酮均为分析纯，国药集团化学试剂有限公司。
DPPH（1,1-二苯-2-苦肼基，C18H12N6O6,相对分子质量394.3，纯度90%）。
2.3仪器
BS224S型电子天平Sartorius公司；KQ-500B型超声波清洗器 昆山市超声仪器有限公司；RE-300旋转蒸发器 上海亚荣生化仪器厂；SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵 长城科工贸有限公司；LGJ-10冷冻干燥机 河南兄弟仪器设备有限公司；Vacucell真空干燥机 北京环宇科信科技有限公司；Centrifuge 5810R台式高速冷冻离心机 德国EPPENDORF公司；infinite M200pro多功能酶标仪TECAN公司。
2.4实验方法
2.4.1 样品的预处理
将四种蔬菜样品洗净，切片，并置于-20℃的冷冻柜冷冻，2-3天后取出放在冷冻干燥机中干燥，等到干燥后进行粉碎，将其保存于真空干燥箱中。从干燥箱中取出处理后的样品，称量，按照实验条件所需，分别称取豇豆，金针菇，鸡腿菇，韭黄样品适量各5份放于锥形瓶中做好标记。
2.4.2 DPPH·溶液配制
用电子天平称取DPPH 4.95 mg，用甲醇溶液将其溶解并定容于容积为100 ml容量瓶中，避光放置。
2.4.3 样品溶液的制备
将豇豆、金针菇、鸡腿菇、韭黄粉末分装在锥形瓶中然后按照1：20的比例分别加入5种提取溶液，再将其进行编号,样品溶液制备完成，用保鲜膜将其封口避免溶剂挥发。
2.4.4样品溶液提取条件
用50%丙酮和丙酮作为提取液的样品溶液，放入超声波清洗器中，常温超声1 h。
用水、50%乙醇、乙醇作为提取液的样品溶液，放入超声波清洗器中，60℃超声1 h。
2.4.5提取物的获取
将超声提取完成的20个提取物溶液进行抽滤，将滤液分别放入20个已经称量并标记好的鸡心瓶中，置于旋转蒸发器上进行浓缩，直到提取液呈现粘稠状时停止，将其冷却然后放入真空干燥机中干燥1 h。将鸡心瓶从真空干燥机中取出冷却然后称重（鸡心瓶与样品总重）。
2.4.6提取物溶液的制备
称量一定量干燥后的提取物，配制成浓度范围为1mg/ml~10mg/ml的提取物溶液，以此提取物溶液进行抗氧化活性测定。
2.4.7抗氧化性的测定
参考文献[8]得到 DPPH·清除率按下面公式：
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