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大肠杆菌胞内转化甲醇至赖氨酸开题报告

 2020-06-04 08:06  

1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)

1.1甲醇的利用现状和优势

当前生物制造的原料仍然以粮食为主,但随着粮食危机日益加剧以及其价格不断攀升,以粮食为原料的生物制造正面临严峻考验。为了解决原料来源问题,实现生物制造可持续发展,目前逐渐将”甲醇经济”发展为合理的可替代能源,以甲醇为原料,从而缓解化石能源的紧缺。与其他原料相比,甲醇具备以下优势:①价格低廉,当前甲醇的价格是葡萄糖价格的1/3;②来源广泛,从天然气、煤化工、生物质等均可合成;③含能高,为目标产物的合成提供充足还原力。因此,以甲醇替代粮食作为原料,可以大幅度降低生物制造的成本,以及提供更充足的还原力,实现生物制造的的可持续发展。

1.2甲醇利用微生物的研究现状

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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

1、 甲醇脱氢酶酶活的提高

在甲醇代谢途径组装完成后,通过酶活的定量检测以及现有研究报道,确定了限速酶为甲醇脱氢酶。将来源于escherichia coli mg1655中的激活蛋白nudf通过酶切位点saci和sali连接构建到质粒petduet-nudf- rump,从而定量比较甲醇脱氢酶的酶活。

2、 赖氨酸合成与甲醇消耗菌株共表达构建

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