发酵元宝枫叶对育肥猪肌肉脂肪酸含量的影响任务书
2021-12-28 09:12
全文总字数：4921字
1. 1. 毕业设计（论文）的内容、要求、设计方案、规划等
（一）前言部分：清晰准确的描述研究意义，适当引用前人的研究进展；完整准确切入本研究的切入点；简明扼要地介绍拟解决的关键问题。
随着我国居民生活水平的不断提高，人们对肉类食品的质量要求也越来越高。猪肉作为我国居民的日常消费产品，其品质安全在很大程度上取决于饲料的安全状况。饲料中添加抗生素可以显著提高猪的生产性能和对营养物质的利用率，但也会带来猪肉产品抗生素残留和环境污染等问题。因此，开发一类无污染、无残留、具有防病和促生长等作用的饲料或饲料添加剂来代替抗生素，对提高猪肉品质安全等问题具有重要的现实意义。
近年来，为减少抗生素的使用，微生物发酵植物饲料是国内外养殖领域研究的重点。许多猪和鸡的动物试验表明，微生物发酵植物中含有促进动物生长的生物活性成分，该活性成分可提高饲料转化率，增加饲粮适口性，改善动物肠道菌群结构、肌肉脂肪酸组成和肉品质，延长货架期等。元宝枫是槭树科槭树属的落叶乔木，元宝枫叶营养成分丰富，氨基酸含量高达11.79%，属优质蛋白质资源；并含有黄酮、绿原酸、有机酸、鞣质、强心甙、萜和酚等生物活性成分，其中黄酮和绿原酸含量较高。目前，动物营养领域中有关元宝枫叶生物饲料的研究应用比较少。因此，可在充分利用元宝枫叶优良蛋白质的同时，利用其中特有的黄酮、绿原酸和多糖等天然活性物质，从而改善猪肉品质。
（二）研究内容
本试验首次探讨在育肥猪饲粮中添加元宝枫叶发酵物对其肉品质和肌肉脂肪酸的影响，并将其与未发酵的元宝枫叶进行比较，以期为元宝枫叶生物饲料在育肥猪中的应用提供理论依据。
（三）方案拟定：试验的设计根据本课题组的方案统一进行。试验设计、材料与方法的描述要合理。
1 材料与方法
1.1 元宝枫叶发酵物的制备及其有效成分分析
元宝枫叶发酵物的主要制备步骤包括：营养盐溶液的配制、固体培养基的制备、发酵培养基的准备、产朊假丝酵母（Candida utilis，购自中国普通微生物菌种保藏管理中心菌种库，ACCC2060）和黑曲霉（Aspergillusniger NL-1，购自中国普通微生物菌种保藏管理中心菌种库，ACCC30005）的菌种接种发酵（两个菌种均由南京林业大学化工院2304保藏）、干燥粉碎。
1）按每100 mL营养盐溶液中含有2 g葡萄糖、3 g尿素、2 g磷酸二氢钾、0.5 g七水合硫酸镁配制成营养盐溶液，调pH至5.0。
2）按元宝枫叶粉末：麸皮：豆粕=8:1:1的比例制备固体培养基。
3）按每10 g固体培养基加11 mL营养盐溶液的比例配制成发酵培养基，将配制好的发酵培养基在121 ℃下灭菌50 min。
4）将发酵培养基首先接种产朊假丝酵母菌种，采用种子液体培养法，28 ℃、150 r/min下振荡培养，每10 g发酵培养基接种1.2 mL产朊假丝酵母，（281） ℃下培养（121） h；之后按同样的比例接种黑曲霉菌种，（281） ℃下培养（361） h。按照常规发酵方法进行发酵。
5）在低于40 ℃条件下完成发酵物料的干燥，粉碎即得元宝枫叶发酵物样品。
6）随机抽取4个未发酵的元宝枫叶样品及分批次发酵所制备的4个元宝枫叶发酵物样品，进行有效成分含量分析。分光光度法以芦丁为标准品测定总黄酮和绿原酸含量，凯氏定氮法测定粗蛋白质含量，硫酸铜沉淀法测定真蛋白质含量，液相色谱法测定氨基酸含量。
1.2 试验设计与试验动物
本试验采用单因素随机设计，将48头胎次、初始体重[（55.201.40） kg]、日龄基本一致的杜长大育肥猪（公母各占1/2，全部去势）随机分为3个组，每组4个重复，每个重复4头猪。对照（CON）组饲喂基础饲粮，未发酵元宝枫叶（UFA）组和发酵元宝枫叶（FA）组饲粮分别在基础饲粮中用12%未发酵元宝枫叶和发酵元宝枫叶粉末替代等量的麸皮。预试期7 d，正试期63 d。
1.3 试验饲粮与饲养管理
元宝枫叶发酵前后的代谢能实测值分别为8.87和9.38 MJ/kg。基础饲粮参照NRC（2012）分阶段配制成粉料，其组成及营养水平见表1。
试验前先对供试猪舍进行消毒，测定试验猪体重，并编号、分组。按照猪场常规饲养管理程序进行驱虫和防疫。试验期间每天饲喂3次，计量不限量，自由饮水。各组试验猪饲养在同一猪舍，各重复皆分隔为相同的圈，饲养管理条件一致。试验期间试验猪没有进行免疫接种，全期无死淘。试验结束前1天进行限饲，最后1天将所有试验猪称重后用电击棒（110 V，5 A）将其击晕，悬挂颈动脉放血，整个过程在30 s内完成以确保试验猪的痛苦降到最低。待试验猪没有角膜反射后，进行胴体性状测定；采集背最长肌样品，用于肉品质检测。
表1 基础饲粮组成及营养水平（风干基础）
Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets(air-dry basis) %
项目 Items | 组别 Groups | ||
对照组 CON | 未发酵元宝枫叶 UFA | 发酵元宝枫叶 FA | |
原料 Ingredients | |||
玉米 Corn | 70.00 | 70.00 | 70.00 |
麸皮 Wheat bran | 12.00 | 0.00 | 0.00 |
豆粕 Soybean meal | 15.00 | 15.00 | 15.00 |
石粉 Limestone | 0.85 | 0.85 | 0.85 |
未发酵元宝枫叶 Unfermented Acer truncatum leaves | 0.00 | 12.00 | 0.00 |
发酵元宝枫叶 Fermented Acer truncatum leaves | 0.00 | 0.00 | 12.00 |
磷酸氢钙 CaHPO4 | 0.80 | 0.80 | 0.80 |
L-赖氨酸盐酸盐 L-lysHCl | 0.15 | 0.15 | 0.15 |
食盐 NaCl | 0.20 | 0.20 | 0.20 |
预混料 premix1) | 1.00 | 1.00 | 1.00 |
合计 | 100.00 | 100.00 | 100.00 |
营养水平 Nutrient levels2) | |||
代谢能 ME/(MJ/kg) | 13.17 | 13.20 | 13.26 |
粗蛋白质 CP | 15.73 | 15.59 | 16.73 |
钙 Ca | 0.71 | 1.37 | 1.32 |
有效磷 AP | 0.58 | 0.71 | 0.73 |
赖氨酸 Lys | 0.80 | 0.86 | 0.87 |
蛋氨酸 Met | 0.27 | 0.28 | 0.29 |
1）预混料为每千克饲粮提供 Premix provided the following per kgof diets：VA 6 000 IU，VB12 mg，VB2 4 mg，VB5 10 mg，VB631 mg，VB12 1 mg，VD3 800 IU，VE 20 IU，VK3 2 mg，生物素 biotin0.02 mg，叶酸 folic acid 20 mg，D-泛酸 D-pantothenic acid 11 mg，烟酸nicotinic acid 10 mg，Cu (ascopper sulfate) 21 mg，Fe (as ferrous sulfate) 100 mg，Mn (as manganese sulfate) 90 mg，Zn (as zinc sulfate) 60 mg，I (as potassium iodide) 1 mg，Se (as sodium selenite) 0.30 mg。
2）营养水平为计算值。Nutrient levels were calculated values．
（四）测定的指标与方法
取胴体左侧最后肋骨处背最长肌（眼肌），吸干表面血液，用自封袋将肉样保存并做好标记，用于肉品质和肌肉营养成分的测定。利用testo 205酸度计测定肌肉的pH；Salter剪切力仪测定肌肉的剪切力；允许膨胀压缩仪PY-1测定肌肉的系水力；色彩色差仪测定肌肉的亮度值（L*）、红度值（a*）和黄度值（b*）。
肌肉中粗蛋白质含量参照周贵的方法进行测定；粗脂肪含量按照《猪肌肉品质测定技术规范》（NY/T 8212004）的方法进行测定；脂肪酸含量按照《食品中总脂肪、饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸的测定》（GB/T 222232008）的方法进行测定。
（五）数据分析，对结果与分析的描述要求准确到位。详细做好实验记录，数据分析用SPSS或SAS数据分析软件。要求会用Excle进行常规作图。
试验数据采用Excel 2013 进行初步整理，用SPSS20.0软件进行统计分析，采用单因子方差（One-Way ANOVA）分析进行差异显著性检验，并采用邓肯氏（Duncans）法进行多重比较。
（六）讨论和结论：对结果与分析的描述要求准确到位。讨论与结论部分应论点明确，重点突出，不能与结果重复、离题。
2. 参考文献（不低于12篇）
指定阅读的中文参考文献如下：
[1] 涂小丽, 钟芳, 邓伏清, 等. 微生物发酵饲料对生长猪生产性能和营养物质利用率的影响[j].饲料工业, 2015, 36(4): 36-38.
[2] 乔艳明, 杨茉莉, 陈文强, 等. 多菌种复合发酵饲料对杜长大育肥猪生产性能的影响[j]. 家畜生态学报, 2016, 37(1): 31-36.
