1. 研究目的与意义（文献综述）

1. 目的及意义（含国内外的研究现状分析）

益心巴迪然吉布亚颗粒有补益心脑、利尿、止喘的功效。主要用于治疗神疲失眠，心烦气喘，神经衰弱等。其主要药材香青兰(draeocephalum moldavica)系蒙古族和维吾尔族习用药用植物，有数百年的药用历史。蒙古名为毕日阳古，维吾尔名为巴迪然吉布亚；香青兰生长于海拔 220～1600m的干燥山地、山谷、河滩多石处，其在我国的资源十分丰富，分布于新疆、吉林等。

香青兰具有补益心脑、活血化瘀、通路开窍之功能，在维吾尔医学和民间用于治疗冠心病、高血压、寒性神经性头疼等疾病。其主要含有黄酮类、三萜类、苯丙素类、甾体类、环烯醚萜类和多糖类等成分，其中黄酮类和苯丙素类成分是其发挥药理作用的主要活性成分。黄酮类成分木犀草素-7-o-葡萄糖醛酸苷、刺槐素-7-o-葡萄糖醛酸苷和田蓟苷等既是香青兰中含量较高的成分，也是扩张冠脉、降低冠脉血管阻力的主要活性成分^[1-4]。

2. 研究的基本内容与方案

参照香青兰试行标准（见附件），选取料液比、超声时间、点样量作为考察因素，每个因素三个水平，进行单因素考察，以样品中田蓟苷斑点清晰无干扰为标准，筛选出最佳提取工艺与点样量。因素及水平详见下表。

表一 因素水平表

选取最佳料液比、超声时间及点样量，其他实验操作依照香青兰试行标准进行，建立出益心颗粒中田蓟苷薄层鉴别方法。

1.2方法验证

对上述实验所建立的方法进行验证，以确认所建立的方法能够准确鉴别出益心颗粒中的田蓟苷，且方法可重现。

1.2.1专属性

将阴性样品、田蓟苷对照品、供试品同时点样于同一薄层硅胶板上，展开，日光灯下观察，若阴性无干扰且供试品中田蓟苷斑点清晰，则认为此方法专属性好。

1.2.1重现性

取同一批样品，在不同的实验室和不同实验人员的操作下，按相同的方法制备田蓟苷对照品，供试品，并同时于同一薄层硅胶板上展开。若供试品色谱中，与田蓟苷对照品对应的位置上，显相同颜色的斑点且两次实验结果一致，则认为此方法重现性良好。

2.1.2、益心颗粒中田蓟苷含量测定标准研究

2.1、限量标准

2.1.2、药材含量及转移率

依据香青兰试行标准调研市场上不同来源的香青兰中田蓟苷的含量,并参照益心颗粒生产工艺规程中的提取工艺研究田蓟苷的转移率，后通过小试制剂实验得出益心颗粒中田蓟苷的含量情况。

2.1.3、成品含量

测调研市售的益心颗粒（不同厂家）中田蓟苷的含量水平，为制定田蓟苷限量标准作参考。

结合上述两个实验所得结果制定出益心颗粒中田蓟苷合理的限量标准。

2.2、检测方法

2.2.1、方法建立

1. 单因素实验分析出提取关键工艺参数

2. 正交试验

2.2.2、方法验证

1、重复性验证

取同一批益心颗粒，按供试品溶液制备方法平行制备6份，测定样品中田蓟苷的峰面积，平均含量，进而算出其RSD值，判断其重复性，以考察所建立的含测方法的重复性是否良好。

2、精密度验证

取益心颗粒，按供试品制备方法制备1份，精密吸取供试品溶液，按已确定的色谱条件连续重复进样6次，测定峰面积以及计算RSD参数，以考察所建立的含测方法的精密度是否良好。

3、专属性验证

取香青兰的阴性样品溶液在相同色谱条件下进行分析测定。阴性样品溶液的色谱图中，在于田蓟苷对照品色谱峰的相同保留时间处，无色谱峰出现则表明该方法专属性好。

2.2 目标

熟练掌握薄层鉴别和含量测定的方法，基本掌握液相色谱原理和操作以及薄层色谱的原理和操作，以期建立益心巴迪然吉布亚颗粒中田蓟苷的薄层鉴定以及含量测定的方法并验证为益心颗粒中田蓟苷的质量标准研究奠定基础。

2.3 拟采取的技术方案和措施：

参照药典委颁布的香青兰质量标准，采用单因素实验、正交试验等技术手段，结合薄层色谱及液相色谱等色谱技术建立益心巴迪然吉布亚颗粒中田蓟苷的鉴别和含量控制方法。

2.3.1 正交实验

参照《中国药典》2015版附录中所载“药品质量标准分析方法验证指导原则”的相关要求，对所建立的鉴别及含量控制方法进行验证。

3. 研究计划与安排

3.进度安排

第1－2周：查阅相关文献资料，进行现场调研，明确实验内容，完成开题报告。

第3－7周：根据实验方案进行样品收集及方法的建立和考察。

4. 参考文献（12篇以上）

4.参考文献

[1] zhang y p, liu y, yuan y, et al. simultaneous determination of four flavonoids in extractive of dracocephalum moldavica by hplc[j]. chinese journal of hospital pharmacy, 2016.