里氏木霉重组菌产纤维素酶文献综述
2020-06-22 10:06
文 献 综 述 1.引言 农林废弃物是产量最多并且广泛分布于世界各地的木质纤维素类生物质资源,其主要成分为纤维素和半纤维素等多糖类物质及木质素,但长期进化使这些多糖类物质性质极其稳定,为了获得单糖供微生物发酵生产生物燃料和生物基化学品,不仅需要经过预处理破坏木质纤维素坚韧的超分子结构有效剥离纤维素分子并破坏其结晶状态,而且还需要使用催化剂将其水解。
目前无机酸和纤维素酶是最常使用的纤维素水解催化剂,因此形成了化学法水解工艺和酶法水解工艺。
酶法水解工艺是利用微生物发酵生产的纤维素酶将纤维素降解为可发酵性糖,与化学法相比具有单糖产率高、副产物少、反应条件温和、设备要求低、能耗低以及环境友好等优点,但纤维素组分是葡萄糖分子以B一糖苷键聚合而成,与葡萄糖以卜糖苷键聚合的淀粉分子相比非常难水解,需要高效纤维素酶才能将纤维素水解为单糖。
2.里氏木霉里氏木霉所产生的一种主要的纤维酶一纤维二糖水解酶I(cellobiohydrolase1),由单拷贝基因编码,其产量可达里氏木霉胞外分泌性蛋白总量的50%。
由此可见,cbh1启动子是很强的启动子。
因此在对里氏木霉的遗传改造中,常利用cbh1的启动子与终止子序列构建载体,并利用cbh1的前导肽序列引导重组蛋白进行分泌性表达。
里氏木霉具有极好的合成蛋白和分泌蛋白的能力;并具有真核的分泌机制,很可能还具有与哺乳动物系统相似的蛋白修饰性能,如:高甘露糖型和N-糖基化等。
由于里氏木霉具有以上优良性能,再加之其工业化规模发酵条件已比较成熟,这些都促进了对里氏木霉的遗传改造,为同源或异源分泌性蛋白的产生提供了一条行之有效的途径。
里氏木霉不仅具有适于蛋白生产的诸多优点,且对人没有毒性,在产酶条件下也不产生真菌毒素和抗生素。
近年来的实践表明,经过基因工程手术改造的里氏木霉重组菌株是安全无害的。
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