松散蛋白-木聚糖酶融合酶基因的构建及表达开题报告
2020-06-11 08:06
1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)
1.1松散蛋白
近年来,在植物细胞壁中发现一类被称为expansin(松散蛋白)的蛋白新家族,expansin的发现起始于对黄瓜下胚轴细胞壁酸诱导伸展的研究[22]。expansin被认为可以破坏纤维素的微纤维之间或纤维素和其它细胞壁多搪之间的氢键而且没有水解活性。[23]多项研究已经表明,虽然expansin不具有纤维素酶活性,但它能够使滤纸、结晶纤维素、半纤维素结构疏松,从而提高纤维素酶对微晶纤维素的水解程度。用expansins处理由非共价键结合的单一纤维素或纤维素与木葡聚糖人工合成的纤维素纸时,发现纸的强度明显降低,同时不产生还原糖。
在枯草芽孢杆菌中还发现了一种和玉米含有植物expansins类似序列的蛋白,可以破坏纤维素材料,同时不产生可检测出的还原糖,被命名为bxexcl。在水解微晶纤维素时,虽然expansins等松散蛋白自身缺乏水解活性,但与纤维素酶共同作用时水解活力可提高50%[25]。它对水解酶的活性促进作用表明expansin能够从纤维素表面除去多糖链,使纤维素酶接触更多的底物,同时使微纤维表面的葡聚糖对纤维素酶的攻击更为敏感,提高纤维素酶对纤维素的水解活性[24]。
2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
融合扩张蛋白增加木聚糖酶对纤维素类底物的吸附能力,通过分子生物学的手段,结合NCBI上枯草芽孢杆菌全基因组的信息,利用重叠延伸技术构建扩张蛋白-木聚糖酶的融合蛋白
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