半乳糖基转移酶的克隆表达文献综述
2020-06-11 08:06
半乳糖基转移酶是催化从核苷二磷酸半乳糖中将活性半乳糖残基转移给糖基受体分子的酶。
不同的半乳糖基的转移由特异性不同的转移酶完成,即使转移相同的半乳糖基,由于半乳糖基的受体不同,形成的糖苷键也不同,也由不同的酶催化。
综述了近几年研究进展,半乳糖基转移酶以UDP-半乳糖基为糖基供体,由于合成的二糖键不同,主要包括α1,3-半乳糖基转移酶,β1,3-半乳糖基转移酶以及β1,4-半乳糖基转移酶。
人体内大约1%的循环抗体识别一种双糖抗原,即αGal表位。
该表位由α1,3-半乳糖基转移酶(α1,3-galactosyltransferase,GGTA1)通过α1,3键在蛋白或脂类的N-乙酰乳糖胺(N-acetylactosamine,NAcLac)上添加半乳糖形成,位于猪及鼠细胞表面能够为人体内预存的天然抗体识别的主要异种抗原。
一些研究利用转染来检测个别氨基酸残基变更对GGTA1的催化功能及其底物和原料特异性的影响,克隆α1,3-半乳糖基转移酶的序列,为进一步利用其构建真核表达载体,为肿瘤进行基因治疗奠定基础[1,14]。
β1,3-半乳糖基转移酶家族(β1,3-Galactosyltransferase,β3GAL-Ts,CAZy family GT31)是糖基转移酶家族中最具代表性的超酶家族之一,在哺乳动物中它们的活性广泛存在,如I型链合酶活性(Galβ1-3GlcNAcβ1-R),粘蛋白样核心1结构合酶活性,多种糖神经鞘脂活性(如形成神经节苷脂 GM1,Gal-Gb4)[2]。
β1,3-半乳糖基转移酶已经克隆到7个成员(β3GalT1、T2、T3、T4、T5、T6、T7),它们具有一个共同的高度保守的序列图案和核苷酸序列的相似性。
它们都能编码一种Ⅱ型跨膜蛋白质结构域。
在O-糖基化过程中,β1,3-半乳糖基转移酶家族发挥重要功能,因而这个家族可能与肿瘤关系密切。
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