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半乳糖基转移酶的克隆表达任务书

 2020-06-11 08:06  

1. 毕业设计(论文)的内容和要求

论文内容 本实验结合实验室菌库,通过ncbi网站对半乳糖基转移酶基因和蛋白进行筛选,设计相关引物,扩增其基因,与质粒进行重组并导入宿主细胞进行表达,经过载体、诱导温度、诱导时间、iptg浓度等参数的优化,获得可溶性表达的半乳糖基转移酶,并用全细胞进行催化得到此酶的简单应用。

论文要求 1.文献查阅 掌握文献查阅的一般方法,学会使用计算机在中国期刊网,维普数据库,超星数字图书馆,美国化学学会(acs)数据库,ca,sci等检索资源上查阅克隆表达及催化等相关文献。

2.文献阅读及综述 阅读与课题相关的外文及中文文献,了解国内外的研究动态,撰写文献综述。

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2. 参考文献

[1] 贾红红, 李玉, 刘逸寒,等. α1,2-岩藻糖基转移酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达[J]. 生物技术通报, 2011(3):185-190. [2] 杨丽娟, 陈艳华. β1,3-半乳糖基转移酶家族研究进展[J]. 中国现代医药杂志, 2016, 18(8). [3] 常宏宇, 章扬培. α1,3-半乳糖转移酶及其相关糖基转移酶的研究进展[J]. 军事医学, 2008, 32(5):478-481. [4] 钟文涛. β-1,4-半乳糖基转移酶的纯化及活性测定[D]. 浙江大学, 2005. [5] 金慧. β-1,4-半乳糖基转移酶在毕赤酵母中的克隆、表达及活性测定[D]. 浙江大学, 2005. [6] 宣翾, 吕小希, 刘莹,等. β1,4-半乳糖基转移酶Ⅰ的研究进展[J]. 2013. [7] 吴文英. beta-1,4-半乳糖基转移酶基因的克隆及表达[D]. 浙江大学, 2002. [8] Endo T, Koizumi S, Tabata K, et al. Cloning and expression of β1,4-galactosyltransferase gene from Helicobacter pylori[J]. Glycobiology, 2000, 10(8):809-13. [9] Ge Z, Chan N W C, Palcic M M, et al. Cloning and Heterologous Expression of an α1,3-Fucosyltransferase Gene from the Gastric Pathogen Helicobacter pylori *[J]. Journal of Biological Chemistry, 1997, 272(34):21357-21363. [10] Chen C, Liu B, Xu Y, et al. Biochemical characterization of the novel α-1, 3-galactosyltransferase WclR from Escherichia coli O3.[J]. Carbohydrate Research, 2016, 430:36-43. [11] 王晓玉, 刘飞, 颜震,等. 浸麻芽孢杆菌环糊精葡糖基转移酶的克隆与表达[J]. 中国生化药物杂志, 2012, 33(1):46-48. [12] 杨明浩, 郭军. 小鼠α1,3-半乳糖基转移酶基因的克隆及测序[J]. 昆明医科大学学报, 2006, 27(3):19-22. [13] 沈爱国, 姚登兵, 丁斐,等. 正、反义β1,4半乳糖基转移酶-I表达质粒的构建[J]. 南通大学学报:医学版, 2002, 22(4):368-370. [14] Koizumi S, Endo T, Tabata K, et al. Large-scale production of UDP-galactose and globotriose by coupling metabolically engineered bacteria.[J]. Nature Biotechnology, 1998, 16(9):847-50. [15] 李楠, 李苏红, 徐杰,等. α-半乳糖苷酶的催化机理及底物特异性[J]. 粮油食品科技, 2014, 22(3):92-97.

3. 毕业设计(论文)进程安排

起讫日期 设计(论文)各阶段工作内容 备 注 2009.2.26-2009.3.2 初步实验,考察初步结果 2009.3.3-2009.3.9 查阅文献,设计实验方案 2009.3.10-2009.5.4 完善实验方案,系统地进行实验 2009.5.5-2009.5.31 整理实验数据,总结实验结果 2009.6.1-2009.6.15 撰写毕业论文

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