摘 要

本研究对骆驼刺健康植株的叶片进行了采样，筛选得到了一株产胞外多糖的细菌，并对该菌进行了形态学分析和分子生物学鉴定。鉴定结果表明：该菌株归属于为泛菌属。菌落呈圆形，边缘整齐，表面光滑，半透明，小凸起，菌体呈细长杆状，可产生胞外多糖，具有泛菌属的典型特征。经过后期的基因组DNA提取及分子生物学鉴定，发现其16S rRNA序列与GeneBank库中的骆驼刺泛菌Pantoea alhagi LTYR-11Z的同源性达到100%。结合形态学分析结果，最终将该菌株鉴定为存在于骆驼刺植物叶片中的内生细菌-骆驼刺泛菌，为后续植物的促生以及抗逆相关方面的研究奠定了基础。

关键词：骆驼刺泛菌，筛选，鉴定，促生

Screening and characterization of Alhagi generic bacteria

Abstract

This study has carried on the sampling of alhagi health plant leaves, and making use of the special half choose culture screening of strain, the inhibitory action, and analyzed the morphology and molecular biology of the bacteria identification. The identification results show that the strain belongs to genera. The colonies are round, with neat edges, smooth surface, translucent surface, small bulge, and slender rod shape. The bacteria can produce extracellular polysaccharide, with typical characteristics of genera. After later DNA extraction and molecular biological identification, it was found that its 16S rRNA sequence was 100% homologous with Pantoea alhagi ltyr-11z, a common bacterium of camel thorn in GeneBank library. Combined with the morphological analysis results, the identification of this strain as a plant endogenous fungus with biocontrol effect was supported.

Key Words：Pantoea alhagi；screening；identification； promotion of birth

目录

摘 要 Ⅰ

Abstract Ⅱ

第一章 文献综述 1

1.1干旱对小麦等农作物的危害及其防治手段 1

1.11干旱 1

1.12干旱对小麦等农作物的危害 1

1.13干旱的治理措施 1

1.2骆驼刺内生菌 2

1.21植物内生菌 2

1.22生物学习性 2

1.3促作物抗旱机制 3

1.31内生菌的定殖 3

1.32内生菌的作用机制 3

1.4研究目的 3

第二章 实验材料与方法 4

2.1实验试剂与仪器 4

2.1.1实验试剂 4

2.1.2实验仪器 5

2.2目的菌株的筛选 5

2.2.1样本采集与处理 5

2.2.2目的菌株的筛选 6

2.3目的菌株的鉴定 6

2.3.1目的菌株的形态学鉴定 6

2.3.2目的菌株的基因组DNA的提取 7

2.3.3 PCR扩增细菌16S rRNA序列 8

2.3.4 PCR扩增细菌保守基因 8

2.3.5琼脂糖凝胶电泳检测 9

2.3.6 分子生物学鉴定 9

2.3.7 产糖能力鉴定 10

第三章 结果与讨论 11

3.1内生细菌的筛选与鉴定结果 11

3.1.1目的菌株的筛选结果 11

3.1.2目的菌株的形态学分析 11

3.1.3目的菌株的序列测定与分析 12

3.1.4 产糖能力测定 15

3.2讨论 15

第四章 前景与展望 16

参考文献 17

致谢 19

文献综述

1.1干旱对小麦等农作物的危害及其防治手段

1.1.1干旱

随着农业的发展，生产水平的提高，环境破坏日益严重，各种自然灾害频发不断，其中最主要的一个便是干旱。淡水总量少则称为干，而少到无法满足人类对于生命活动和经济发展的需求了，便成了一种灾害，称之为干旱。干旱所持续的时间之久，造成的后果之严重让人们不得不采取措施。

上涨的人口数量，飞速发展的经济，显得水资源更加宝贵，也直接造成了干旱地区面积越来越大，程度越来越严重。干旱引起了全球人民的关注。

民以食为天，不管是农耕还是畜牧，都是万万不能离开水的。干旱导致的严重缺水使农作物无法正常发育，随着时间的推移会造成损害。随着干旱时间的延续和范围的扩大，最终变成了旱灾。至此农作物的产量大幅度降低，甚至颗粒无收^[1]。

1.1.2干旱对小麦等农作物的危害

干旱对小麦等农作物有非常严重的危害，它影响着植物的生长和作物的产量。水的缺乏会促使活性氧和脱落酸的产生，从而使作物体内多种有机物受到影响，比如蛋白和脂质^[2]。

植物内部代谢和外部环境的相互作用促成了植物的生长。对外部环境而言，水的效力起主导作用。由此可见水对于植物的重要性。充足的水分是植物健康生长的基础。Hsiao等^[3]指出叶片的扩展和它的生长最为敏感的就是它们对于缺水的表现，不管是多么轻微的干旱都会使它们受到明显的限制。

干旱会对植物的生命活动造成很多影响。比如限制光合作用的速率，从而降低了能量转化的效率，影响光合碳同化^[4]。水分的缺失还会干扰植物的呼吸作用和代谢等，也包括植物信号的传递，通过这些方面，它影响着植物的生长和发育。

1.1.3干旱的治理措施