氨氮对克氏原螯虾的96h急性毒性研究
2023-12-20 10:12
论文总字数：8624字
摘 要
本实验通过半静水式水生生物急性毒性试验法，研究氨氮对克氏原螯虾的急性毒性效应。计算出氨氮对克氏原螯虾成虾的72h、96h半致死浓度（LC50）及安全浓度（SC）。结果表明，克氏原螯虾对氨氮有较强的耐受力，在pH(8.10±0.02)、水温（17±0.5）℃的条件下氨氮对克氏原螯虾试验虾72h的半致死浓度(LC50)为518.54mg/L，96h的半致死浓度（LC50）为464.60mg/L，安全浓度（SC）为46.46mg/L。关键词：克氏原螯虾，氨氮，急性毒性，半致死浓度（LC50）,安全浓度（SC）
Abstract: This experiment studied the acute toxic effects of ammonia on Procambarus clarkii, that used the semi-aquatic organisms hydrostatic type of acute toxicity test method. At the same time, we calculated 72h, 96h median lethal concentration (LC50) and safe concentration (SC) that the ammonia on Procambarus clarkia. The results showed that there is a strong tolerance for Procambarus clarkia to ammonia. In pH(8.10±0.02), water temperature (17±0.5) ℃ conditions. the lethal concentration test (LC50) 72h was 518.54mg/L,the 96h median lethal concentration (LC50) was 464.60mg/L and the safe concentration (SC) was 46.46mg/L.
Keywords: Procambarus clarkii, ammonia-N, acute toxicity
目 录
1 前言 5
2 材料与方法 5
2.1 试验材料 5
2.2 方法 5
2.2.1 预备试验 5
2.2.1.1 预备试验步骤 6
2.2.1.2 预备试验结果 6
2.2.2 正式试验 7
2.2.2.1 试验准备 7
2.2.2.2 试验步骤 7
3 结果与分析 8
3.1 中毒症状 8
3.2 正式试验结果 8
3.3 结果分析 8
4 讨论 10
结 论 12
参 考 文 献 13
致 谢 15
1 前言
克氏原螯虾俗称淡水小龙虾，原产于北美洲，分类学上属节肢动物门甲壳纲十足目螯虾科淡水螯虾属，1929年由日本传入我国江苏省，经自然繁衍几十年，克氏原螯虾已广泛分布于我国大部分省市，在一些地区和湖泊已形成优势种群，成为我国重要的水产资源[1]。
克氏原螯虾味道鲜美，肉质细嫩，营养丰富，易消化，具有补肾、健胃、防止胆固醇蓄积等作用，市场消费和出口需求缺口很大，开发前景广阔。有关克氏原螫虾的研究主要集中在形态结构、幼体发育、基础代谢和养殖技术等方面[1-5] ，相比较而言，对克氏原螯虾的毒性研究报道不多。
氨氮是水产养殖环境中的一种重要环境污染因子。研究表明，高浓度氨氮胁迫对甲壳动物的免疫和肝胰腺有着重要影响，长时间胁迫导致其免疫力下降，肝胰腺组织结构受到破坏[6-9]。在水体溶氧充足的条件下克氏原螯虾对氨氮的耐受力较强，但是在生产养殖过程中不应忽视氨氮的危害。环境中高浓度的氨氮会抑制水生动物的氨排泄，使得水生动物难以将体内的含氮废物以氨的形式排出，反而会从水环境中吸收一部分氨，导致体内积累大量的氨，从而导致其生长缓慢，甚至死亡[10-11]。
本试验对水体中氨氮对克氏原螯虾成虾的急性毒性作用进行了研究，旨在找出氨氮在克氏原螯虾养殖水质中的安全浓度，为其养殖过程中的水质管理提供依据。
2 材料与方法
2.1 试验材料
试验用克氏原螯虾采于江苏省新大运生态农业开发有限公司所属养殖基地（盱眙）。挑选其中体质强壮、附肢齐全、健康活泼、规格一致的个体作为试验虾。克氏原螯虾体长10±1.5cm，体重20±4.0g，试验前24h停止喂食。
试验药品：NH4Cl（分析纯），（产自上海久亿化学试剂有限公司）。
试验设备：实验室水产养殖系统，（每个玻璃缸规格为 80 cm×50 cm×47 cm），SX-620笔试pH测试仪，电子天平。
试验用水：为经充分曝气的自来水，其水质指标如下：温度17±0．5℃，pH 8.10±0.02， NH4＋-N(NH3)、NO2＋-N均未检出[12]。
2.2 方法
2.2.1 预备试验
2.2.1.1 预备试验步骤
对克氏原螯虾暂养2-3 d，暂养之前停止喂食，而后挑选体重体长相近的克氏原螯虾，分为8组，每组10尾。分别放入装入含有30L药液的养殖玻璃缸中。
将NH4Cl配置成母液，按比例稀释至所需浓度，稀释用水为已经过充分曝气，以保证水体有充足的溶氧。设定7个浓度梯度和1个对照组。试验分组及浓度设置详见表1。
水体中非离子氨在总氨中所占的比例与温度和pH值有关，换算公式如下：
f=100/(10Pka-pH 1) 其中Pka=0.09018 2729.92/(273.15 t)温度范围为0～50℃
再由测得的氨氮浓度C0(mg/L)求得非离子氨浓度(mg/L)：
C=1.216×C0×f/100[13] 。
表1 氨氮对克氏原螯虾的急性毒性预备试验分组
对照 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | |
氨氮浓度/（mg/L） | 0 | 314.31 | 419.08 | 523.85 | 654.82 | 785.78 | 916.74 | 1047.71 |
非离子氨浓度/（mg/L） | 0 | 14.67 | 19.56 | 24.45 | 30.57 | 36.68 | 42.79 | 48.90 |
试验采用半静水式水生生物急性毒性试验法，试验期间每24h全部换液1次，保证每个容器中试验期间药液浓度的稳定。试验期间克氏原螯虾禁止喂食，并及时清污。
试验开始后96h作连续观察，每隔3小时观察克氏原螯虾的中毒死亡反应情况，测定水体pH和水温，及时将死虾取出。试验期间，记录克氏原螯虾的死亡个体数量。其死亡个体以细玻璃棒触及腹部5分钟内不产生刺激反应为准。
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