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斑马鱼骨骼肌收缩蛋白变化对束丝藻毒素的响应开题报告

 2021-03-15 10:03  

1. 研究目的与意义(文献综述)

研究背景:

随着工业的飞速发展和人类对自然环境的保护意识淡薄,产生的许多外源污染物被排放至滇池这样的水体,使得滇池水富营养化程度加重,从而导致滇池内的蓝藻水华暴发肆虐。水华束丝藻是束丝藻水华的优势种之一,是一种能够在世界性富营养化水体中快速繁殖的有毒丝状蓝藻,能产生束丝藻毒素,含有麻痹性贝类神经毒素(psps)成分,属于神经毒素,毒性强、致毒快,导致水中的滤食性鱼类快速大量死亡,对人类的健康和水环境安全构成了巨大的威胁。

束丝藻毒素由海洋甲藻、淡水蓝藻甚至是细菌分泌,属于生物碱性神经毒素,具有水溶性。在于淡水系统中,能累积到一个很高的水平,可以通过食物链从甲藻、丝状蓝藻、细菌等逐级积累到海贝、贻贝等动物体内打扫较高浓度水平,且这些动物对该神经毒素具有很强的耐性,因此贻贝等动物不表现中毒症状,极具隐蔽性,容易通过食物链进入鱼体和人体内而引起中毒。更为严重的是这种毒素能够耐酸性和耐高温性,用普通烹调方法和水处理方法尚不能完全去除污染该毒素食品中的毒性,因而处在食物链顶端的人类的中毒率和死亡率很高。目前,仍然没有有效的方法治疗束丝藻毒素的中毒症状,会严重危害生态系统和人类健康。

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2. 研究的基本内容与方案

基本内容:

本研究以滇池水华期间(2009)采集分离的水华束丝藻为材料,藻株经实验室分离、纯化、培养、细胞内毒素抽提和纯化,毒素含量和成分分析后,通过腹腔注射(5.3 and 7.61mg stxeq/kgbw作为低浓度和高浓度)对斑马鱼进行毒素处理,在染毒后的24小时内的不同时间点(0,1,3,6,9,12 和 24h),速取斑马鱼骨骼肌组织,对其收缩蛋白,如肌动蛋白(actin)、肌球蛋白(muosin)、原肌球蛋白(tropomyosin),肌钙蛋白(troponin)(紫外分光光度法),肌红蛋白(myoglobin),钙释放通道蛋白或ryanodine 受体(ryanodine receptor 1,或calciphorin),钠通道蛋白含量、及基因(如肌动蛋白基因(a-或b-actin)、,肌球蛋白基因(a-myosin heavy chain(a-mhc)、原肌球蛋白基因(tm1) 、肌钙蛋白基因(tnt,tnc,tni)、肌红蛋白基因(mb)、钙释放通道蛋白基因(ryr1)、钠通道蛋白基因(nav1.4))表达的变化、及骨骼肌形态结构的变化等进行研究。

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3. 研究计划与安排

第1周:资料查找,筛选,阅读,讨论和立论

第2周:研究思路和研究方法的设计、筛选和选择(根据自身能力和实验室条件确定)和细化,讨论和方案定稿(包括设备,药品等);

第3周:设备仪器的熟悉,讨论,器具和器皿的准备,药品的准备,包括定购必要的药品,进行等;

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4. 参考文献(12篇以上)

[1] 逄金柱,王瑞元; 周耐力训练对大鼠骨骼肌肌动蛋白和肌球蛋白重链基因表达的影响. 中国运动医学杂志,24(4):415-418.

[2] 邓少颖,王道营,张牧焓,等.鸭胸肌肉加热过程中肌动球蛋白解离研究。食品科学,2015,36(1):1-6.

[3] 马栋, 杜习翔, 赵洁 血清肌钙蛋白检验.中国健康文摘,2011,8(1):106-108

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