1. 毕业设计（论文）主要内容：

毕业设计的主要目标是应用CRISPR-CAS技术敲除黑色素瘤细胞MM-MC中PRNP基因。学习并设计CRIPSR-cas方法，设计引物，转染癌细胞，筛选单克隆，验证PrP基因的敲除。最后验证PRNP基因失活后对肿瘤细胞的影响。

2. 毕业设计（论文）主要任务及要求

1、 查阅不少于5篇相关资料（全部为英文），完成开题报告。

2、 掌握基于crispr-cas的基因敲除方法。

3、 完成不少于12000字的毕业论文。

3. 毕业设计（论文）完成任务的计划与安排

　第1－2周：查阅crispr-cas技术等相关文献资料，明确研究内容，拟定试验方法和条件。确定方案，完成开题报告。

　　第3－11周：完成引物设计，癌细胞转染、单克隆筛选以及prnp基因敲除验证以及prnp基因失活对cfpac-1细胞的影响。

第12周：实验现象分析及实验数据处理。

4. 主要参考文献

[1] overview of crispr-cas9 biology. ratner hk, sampson tr, weiss ds.

cold spring harb protoc. 2016 dec 1;2016(12):pdb.top088849. doi: 10.1101/pdb.top088849.

[2] type iii crispr-cas immunity: major differences brushed aside.