磁性微珠对蛋白质的选择性吸附作用研究任务书

 2020-02-18 05:02

1. 毕业设计(论文)主要内容:

细胞外囊泡是近10年来大热的研究方向,通常细胞外囊泡至少有两大类:一种是外泌体,一种是微泡,细胞内溶酶体微粒(endolysosomal vesicle)内陷形成多囊泡体(multi-vesicular body),在刺激作用下,多囊泡体与细胞膜融合,向胞外分泌的大小均一,直径在40~100 nm 的囊泡为外泌体。微泡可以看做是除了外泌体外的细胞外囊泡,是细胞出芽与细胞膜融合后直接脱落形成的囊泡,大小不一,直径在50 nm~1000 nm之间。微泡没有独特的表面标志物,其膜脂质成分、蛋白组成、密度也还需进一步检测。但由于两类囊泡很难区分,通常得到的细胞外囊泡都包含有两类成分,因此国际胞外囊泡协会在2018年11月23号出版的“”细胞外囊泡学报”上发布2018版指导建议,建议今后用细胞外囊泡这一词来代替外泌体这个词。

细胞外囊泡可携带多种蛋白质、mrna、mirna,参与细胞通讯、细胞迁移、血管新生和肿瘤细胞生长等过程。因此细胞外囊泡可能与多种疾病的发生发展相关联,并因此可能可以作为疾病诊断以及治疗的工具。由此可见细胞外囊泡将是一个容易产生突破的方向,并可能产生大量对生命的新认识,有人甚至认为它可能成为可以取代干细胞在临床治疗中的应用。

但是细胞外囊泡的分离提取,尤其是分型遇到不小的困难,目前的方法除了磁性微珠法,其他方法大多难以给出可靠的分型结果,大多都是各种细胞外囊泡的集合体。现有的磁性微珠法利用外泌体上特有的蛋白,在磁性微珠表面偶联相关抗体来提取外泌体,该方法理论上应该可以得到更为可靠的外泌体,但也有资料指出,其提取过程中非中性ph和非生理性盐浓度会影响外泌体生物活性,不便进行下一步的实验。而且抗体相对贵重,因此提取代价较高,本项目拟制备新型磁性微珠以降低成本,获得特定的细胞外囊泡。

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2. 毕业设计(论文)主要任务及要求

1. 查阅不少于15篇的相关资料,其中英文文献不少于3篇,完成开题报告。

2. 合成粒径适合要求的磁性微粒。

3. 寻找合适的磁性微珠修饰方法修饰磁性微珠。

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3. 毕业设计(论文)完成任务的计划与安排

第1-2周:调研阅读资料,准备开题
第3周:开题,准备实验用品。

提交阶段性报告
第4-14周:实验,中间穿插资料重新检索、撰写论文等。

期间提交2次阶段性报告。

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4. 主要参考文献

1. clotilde théry, kenneth w witwer, elena aikawa,, er al., minimal information for studies of extracellular vesicles 2018 (misev2018): a position statement of the international society for extracellular vesicles and update of the misev2014 guidelines, journal of extracellular vesicles, 8:1, 1535750, doi: 10.1080/20013078.2018.1535750

2. 卢婉,杨人强,王伶.,外泌体的研究进展,生命的化学 , 2013, 33(4): 438-442,doi:10.13488/j.smhx.2013.04.010

3. 贺娇,许泼实,.外泌体提取方法及鉴定分析研究进展,中华实用诊断与治疗杂志,2018,Vol.32,No.7 ,718-721

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