蛋白酶Soak D的应用研究文献综述

 2020-04-03 11:04

文 献 综 述

1.1 课题背景

以酶制剂为基础的制革生物技术在清洁化生产和环境友好方面独具特色,这些技术在制革工业的广泛应用,是解决制革工业严重污染、促进制革工业持续发展的重要途径。随着科学技术的不断发展和进步,以及世界各国环保政策的日趋完善和对环境保护的高度重视,酶制剂在制革行业中的应用范围也不断拓展、扩大。酶制剂已应用于制革的多个工序中,尤其是准备工段。主要包括:酶浸水、酶浸灰、酶脱脂、酶脱毛、酶软化等方面。

1.2 制革用蛋白酶 Soak D的酶活力的测定

1.2.1 前言

酶制剂已成为皮革生产过程中及清洁化制革工艺中不可缺少的一类材料[1]。酶制剂在制革过程的应用主要体现在制革的准备工段,准备工段中各工序的处理对象主要是各种蛋白质(如胶原蛋白、角蛋白、网硬蛋白、弹性蛋白及纤维间质中的白蛋白、球蛋白、蛋白多糖等)和脂肪等。由于酶的作用具有高效性和专一性,因此在准备工段的各工序中可以根据各工序的需要有针对性地选择酶制剂,在较小的用量下达到理想的效果,减少有害物质的使用,缩短处理时间,提高成革的质量。根据制革各工序的要求,人们选择不同的蛋白酶并辅以其他酶和特殊助剂,开发了一系列的制革用酶制剂产品。目前市场上的制革用酶制剂,根据它们的应用性能和特点,主要有以下几类:浸水酶、浸灰酶、脱毛酶、软化酶、酸性蛋白酶、脂肪酶和用于猪皮臀部包酶的酶制剂等[2]。蛋白酶是制革工业中使用最广泛的一类酶。

1.2.2 酶活力测定方法

1.2.2.1 福林法[3]

蛋白酶在一定的温度下和pH条件下水解酪素底物,产生含有酚基的氨基酸(如酪氨酸、色氨酸等),在碱性条件下,将福林试剂(Folin)还原,生成钼蓝和钨蓝,用分光光度计测定, 计算其酶活力。福林法反应条件如下。温度:1398和166蛋白酶的反应温度为30e,其他酶为40e(国标)。pH值:由酶的种类决定。反应时间:10min 1g固体酶粉(或1ml液体酶),在一定温度和pH值条件下,1min水解酪素产生1Lg酪氨酸为一个酶活力单位,以L/g(L/ml)表示。

1.2.2.2 Lohlein-Volard(LVU)法(诺维信公司提供)

碱性酪素溶液在标准条件下进行酶降解反应,加盐酸使反应终止,当酪素被蛋白水解酶分解之后,用硫酸钠沉淀未降解的酪素。滤液用氢氧化钠溶液滴定,滤液中的酸包括加入终止反应的盐酸和酪素降解产生的酸。酪素降解越多,滤液中的酸就越多,沉淀就越少,滴定用氢氧化钠溶液的量增多。滴定所耗氢氧化钠的量直接反映蛋白酶活力大小,通过耗用的碱量即可测得酶制剂的活度。LVU法反应标准条件如下:温度:37e pH值: 8.2反应时间:60min 1LVU定义为在上述标准条件下(37e,pH 8.2)下,酶与酪素反应60min降解1.725mg酪素所需酶的量。

1.2.2.3 胰酶转化倍数法

胰酶能促进酪蛋白的水解作用,胰酶量越多水解的酪蛋白越多。因此,用定量的酪蛋白和不同量的胰酶作用,水解一定时间后,用醋酸盐(或醋酸)指示剂调节反应溶液的pH值到酪蛋白的等电点附近,未被水解的酪蛋白呈白色沉淀析出,而水解产物则不会沉淀,规定恰好使定量的酪蛋白完全水解的胰酶量为确定活度的依据。根据此时胰酶的体积和浓度,可计算出胰酶对酪蛋白的转化能力(以倍数计)。

您需要先支付 5元 才能查看全部内容!立即支付

该课题毕业论文、开题报告、外文翻译、程序设计、图纸设计等资料可联系客服协助查找,微信号:bysjorg 、QQ号:3236353895;