Caldicellulosiruptor kristjanssonii来源α-半乳糖苷酶的克隆表达和酶学性质研究开题报告
2020-05-02 05:05
1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)
文献综述 1.a-半乳糖苷酶简介 糖苷水解酶是一类水解碳水化合物中糖苷键的酶类,主要降解碳水化合物,其在再生能源生产、果汁风味工业生产以及具有医疗价值的低聚寡糖的生产等方面应用前景广泛,因此人们正在致力于寻找具有高活力、性质优良的糖苷水解酶类。
随着分子生物学技术的发展,微生物的基因组序列得以被测定,利用分子生物学方法直接对糖苷水解酶基因进行克隆和表达成为大量筛选糖苷酶的有效方法[1]。
a-半乳糖苷酶也称蜜二糖酶,在自然界中广泛分布,是催化a-半乳糖苷键水解的种外切糖苷酶,主要催化水解以a-键结合的半乳糖苷链非还原性末端。
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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
本课题选用Caldicellulosiruptor kristjanssonii来源α-半乳糖苷酶。
通过PCR克隆的方法获得a-半乳糖苷酶基因,将得到的基因进行高效表达,纯化,并详细研究了其pH、温度、金属离子和化学物质及酶动力学常数等酶学性质。
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