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藏红花细胞悬浮培养生产藏红花素动力学研究开题报告

 2020-04-14 04:04  

1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)

文 献 综 述

藏红花( crocus sativus l. ) 是一种名贵的妇科良药,又可用于功能食品和化妆品的开发,被誉为”植物黄金”,其柱头还含有良好抗癌作用的藏红花素等活性成分,有望成为最理想的抗癌药物之一[1 - 3]。但藏红花主要是柱头入药,田间栽培过程易感染植物病毒,产量极低,又因种植条件苛刻、适宜栽培的地区有限,致使其资源短缺,价格昂贵[3,4]。通过植物细胞培养体系生产藏红花素等,是解决藏红花资源短缺的有效途径之一。

为建立藏红花细胞培养体系,实验室一般从诱导的藏红花愈伤组织中筛选出一株藏红花素含量较高、生长快速的细胞系[5,6],经脱毒处理,该细胞系无鸢尾花叶病毒等国内外报道的侵染藏红花的病毒[7]; 经二步法,建立了其固体培养体系[8]。为通过生物反应器规模化培养藏红花细胞,须进一步建立其悬浮培养体系。与和固体培养相比,液体悬浮培养有良好的流动性、更高的传质效率、便于规模化应用等优点[9]。基于以往研究,建立和优化藏红花细胞悬浮培养体系,为其动力学性质研究提供参考。

松散的愈伤组织常常是植物细胞悬浮培养的适宜材料,稍经机械振荡,即可使愈伤组织分散成单细胞或由几个细胞组成的小细胞团,并在悬浮培养中迅速增殖; 而坚实愈伤组织中的细胞间被果胶质紧紧地粘着,往往不能形成良好的悬浮系统。将2 g生长在m1 固体培养基上的藏红花愈伤组织( 黄色,质地疏松,不透明) 放入20 ml m1 液体培养基中,于( 22 #177; 0. 3) ℃,120 r /min 的摇床上,暗培养10 -15 d,培养基经100 目不锈钢滤网过滤,除去大的细胞团,置于新鲜的培养基中继续培养10 - 15 d; 再次过滤,再次置于新鲜的液体培养基中培养10 - 15 d,便可获得藏红花悬浮培养细胞系。

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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

一. 本课题要研究或解决的问题:

以藏红花细胞为实验材料,研究不同条件藏红花细胞悬浮培养过程中生物量、底物消耗、ph变化、电导率变化以及产物合成和积累变化,从而使植物细胞培养体系生产藏红花素能力得到提高。

二. 拟采用的研究手段(途径):

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