阿扎霉素聚酮合酶烯基还原酶结构域开关机制初探任务书

 2020-02-11 12:02

1. 毕业设计(论文)主要内容:

毕业设计的主要目标是定点突变技术失活阿扎霉素聚酮合酶中可能影响烯基还原酶开关的功能结构域。学习并设计定点突变方法,PCR设计引物,克隆载体构建、蛋白表达、链霉菌接合转移,突变株筛选,突变株的分子生物学验证。


2. 毕业设计(论文)主要任务及要求

1、 1、查阅不少于5篇相关文献(全部为英文),完成开题报告。

2、 2、掌握链霉菌基因敲除方法和蛋白表达技术。

3、 3、完成不少于12000字的毕业论文。

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3. 毕业设计(论文)完成任务的计划与安排

第1-2周:查阅阿扎霉素相关文献资料,明确研究目的和内容,拟定试验方案,完成开题报告。

第3-11周:完成引物设计,基因敲除和蛋白表达载体构建、蛋白表达、链霉菌接合转移,突变株筛选,突变株的分子生物学验证。

第12周:实验结果分析及实验数据处理。

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4. 主要参考文献

[1] wei xu, guifa zhai, yuanzhenliu,yuan li, yanrong shi, kui hong, hui hong, peter f. leadlay, zixin dengandyuhui sun (2017) an iterative module in the azalomycin#8197;f polyketide synthasecontains a switchable enoylreductase domain. angewandte chemie internationaledition56:5503-5506.

[2]yanling ma, wei xu, jun zhang, sihong zhang, kuihong, zixin deng andyuhui sun (2014) nitrilase superfamily arylacylamidase from the halotolerant mangrove streptomyces sp. 211726. applied microbiologyand biotechnology 98:8583-8590.

[3]hui hong, yuhui sun, yongjunzhou, emily stephens, markiyan samborskyy and peter f. leadlay (2016) evidencefor an iterative module in chain elongation on the azalomycin polyketide synthase.beilstein journal of organic chemistry 12:2164-2172.

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