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木霉菌发酵培养基的优化毕业论文

 2022-02-22 08:02  

论文总字数:17533字

摘 要

本文以木霉菌为实验菌株,首先绘制木霉菌的初始生长曲线,以此来确定木霉菌的稳定期以及木霉菌的最佳种龄;然后以木霉菌细胞干重为指标,利用单因素分析法分别对碳源、氮源、无机盐离子进行测定,筛选出最佳的发酵培养基成分。为木霉菌的液体发酵提供理论基础。本论文的最主要研究结论如下:

碳源:在所选取的葡萄糖、麦芽糖、甘油、蔗糖、乳糖5类碳源中,麦芽糖相对于其他碳源对木霉菌的菌丝生长较为有利,因此在木霉菌发酵培养基中最好的碳源应挑选麦芽糖。

氮源:在所选取的有机氮源:牛肉膏、蛋白胨、酵母浸膏,无机氮源:硝酸铵、脲、硫酸铵6中氮源中,相比于无机氮源,有机氮源明显更有利于木霉菌的菌体发酵,在有机氮源中最佳氮源应选择蛋白胨。

无机盐离子:在本实验所用的硫酸锰、硫酸亚铁、氯化钙、氯化钠、氯化钾、硫酸锰6中无机盐中,硫酸镁最有利于木霉菌菌体生长,氯化钙、氯化钠和硫酸亚铁亚铁也能一定程度上增加木霉菌发酵的菌体干重;而氯化钾和硫酸锰对木霉菌的生长没有明显的影响。

关键词:木霉菌 培养基优化 单因素分析

Optimization of Fermentation Medium for Trichoderma

Abstract

In this paper, the initial growth curve of Trichoderma spp. Was used to determine the stable growth period of Trichoderma spp. And the best age of Trichoderma spp.. Then, using the dry weight of Trichoderma as an indicator, the single factor analysis The carbon source, nitrogen source and inorganic salt ion were determined respectively, and the best fermentation medium was screened out. To provide a theoretical basis for liquid fermentation of Trichoderma. The main conclusions of this paper are as follows:

1) Carbon source: In this experiment, it can be seen from the data that the requirement of Trichoderma species is not very high for glucose, maltose, glycerol, sucrose and lactose, and maltose is relatively effective The carbon source is more favorable for mycelial growth of Trichoderma, so the best carbon source in Trichoderma fermentation medium should be selected maltose.

2) Nitrogen source: The choice of nitrogen source has a great effect on the fermentation effect of Trichoderma spp. In general, compared with inorganic nitrogen source, organic nitrogen source is more beneficial to the fermentation of Trichoderma spp. A good nitrogen source should be selected for peptone.

3) inorganic salt ions: inorganic salt ions on the growth of Trichoderma bacteria are different, the difference is greater. In this experiment, several kinds of inorganic salt ions, Trichoderma on magnesium ions in the larger demand in the fermentation process by adding magnesium sulfate can significantly improve the dry weight of Trichoderma bacteria; compared to magnesium sulfate, calcium chloride, Sodium chloride and ferrous sulfate ferrous ferric sulfate can also increase the dry weight of the bacteria produced by Trichoderma; potassium chloride and manganese sulfate have no obvious effect on the growth of Trichoderma.

Key Words: Trichoderma; liquid culture medium; single factor analysis

目 录

摘 要 I

Abstract II

第一章 文献综述 1

1.1木霉菌简介 1

1.1.1木霉菌的生物学特性 1

1.1.2木霉菌的分类 1

1.2木霉菌的作用 1

1.2.1生防作用与机制 1

1.2.2促生作用 3

1.3主要发酵产物 4

1.3.1黄色素 4

1.3.2厚垣孢子 4

1.3.3纤维素酶 5

1.3.4木聚糖酶 5

1.4研究意义 5

第二章 木霉菌发酵培养基的优化 7

2.1材料 7

2.1.1菌株 7

2.1.2 培养基 7

2.1.3仪器 7

2.1.4试剂 8

2.2实验方法 8

2.2.1培养基制备 8

2.2.2木霉菌的活化 9

2.2.3木霉菌初始生长曲线的测定 9

2.2.4培养基的优化 9

第三章 结果和分析 11

3.1木霉菌生长曲线的绘制 11

3.2不同碳源对木霉菌发酵的影响 12

3.3不同氮源对木霉菌发酵的影响 13

3.4无机盐离子对木霉菌菌体生长的影响 14

第四章 结论与展望 16

4.1结论 16

4.2展望 16

参考文献 19

第一章 文献综述

1.1木霉菌简介

1.1.1木霉菌的生物学特性

木霉菌属于半知菌亚门,是土壤微生物的重要类群。在土壤、植物的叶部和种子周围、根部、球茎表面等都有广泛的分布,也曾在动物的粪便上发现。同时木霉菌也作为内生真菌生存于植物的内部,并且在海洋中也有木霉菌的存在。木霉菌的菌丝纤细而透明,有节断,并多有侧枝。在PDA固体培养基上培养时,菌落一开始为白色棉絮状,然后在其中心开始长出绿色孢子并向周围扩散,直至全部布满绿色孢子。在马铃薯葡萄糖液体培养基摇床培养时,菌落多为大小不一疏松的绒球状。

1.1.2木霉菌的分类

Persoon于1794年最早引入木霉菌的分类,最先发表的木霉菌种类只有四类,后证实只有其中一种为木霉菌。在1969年,Rifai建立了首个较为系统的木霉菌分类标准[1]。而后木霉菌的分类系统随着人们的发现逐渐完善化,系统化。到目前为止,我国综合多种分类标准将木霉菌的种类分为21种[2]。并且木霉菌的种类还在增加。而已经应用的木霉菌种类并不是很多。

1.2木霉菌的作用

1.2.1生防作用与机制

随着化学杀菌剂的大量应用,其对环境、人体带来的副作用以及导致病原菌抗药性的增强日益明显,这与农业可持续发展的宗旨相违背。而木霉菌作为具有广谱拮抗作用的生物防治菌逐渐被人们认识并认可。最早了解木霉菌对土传病原菌的拮抗作用是在20世纪30年代[3]。并且在此之后逐渐发现木霉菌能够拮抗很多农作物上的多数病原菌。木霉菌起码对18个属29种病原菌都会产生拮抗[4]。在我国登记生产木霉菌制剂的企业并不是很多,但是木霉菌制剂在市场上的销售量提升很快,需求量越来越大,到目前为止木霉菌的生防制剂已经占据了该类产品市场的将近一半。因此世界各国对木霉菌生防作用的研究都十分关注。木霉菌生防机制有以下几种:

(1)寄生作用

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