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酪氨酸解氨酶在大肠杆菌中可溶性表达方法及其部分特性研究任务书

 2022-01-12 09:01  

全文总字数:3217字

1. 1. 毕业设计(论文)的内容、要求、设计方案、规划等

前言: 综述酚酪氨酸解氨酶的研究现状,了解目前利用分子伴侣共表达提高异源蛋白的机制及应用情况,主要针对针对该酶的来源、外源表达方式、酶学特性和作用机制等方面的研究进展状况展开论述。了解重组蛋白亲和纯化的方法和基于sds-page和hplc的酪氨酸解氨酶学研究的方法。

研究内容:

(1)参考文献及genbank中比对寻找高活性的酪氨酸解氨酶相关基因序列,优化其密码子偏爱性,人工合成基因,构建大肠杆菌表达载体;(2)构建含分子伴侣kje8、gro7、kje7、tf2、tf16等的表达载体共转化大肠杆菌,实现在大肠杆菌的活性表达;(3)比较不同类型的分子伴侣对酪氨酸解氨酶可溶性表达的促进作用, (4)优化表达条件,纯化酶蛋白;(5) 研究该酶的酶学特性。

方案拟定:根据课题内容要求,在查阅文献基础上,制定初步方案,和指导老师讨论后科学合理制定步骤详细,语言简明。

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2. 参考文献(不低于12篇)

[1] 张峰,曾化伟,廖祥儒,蔡宇杰,童超.微生物酪氨酸解氨酶的研究进展[j].食品与生物技

术学报,第29卷第4期.

[2] kyndt j,meyer t,cusanovich m,et al. characterization of abacterial tyrosine ammonia-lyase, a biosynthetic enzyme for the photoactive yellow protein[ j] . febs lett, 2002, 51 2: 240- 244.

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