论文总字数：14441字

摘 要

斑马鱼作为模式生物逐渐被人们重视，但随着需求的增加，集约化生产的逐渐扩大，斑马鱼供应的质量和数量上的问题也逐渐明显。为解决这一问题，斑马鱼胚胎发育的影响因素研究逐渐展开。斑马鱼胚胎的影响因素比较多，如温度，PH，光照，渗透压等在相关文献已有记载。然而其中温度对于斑马鱼发育的影响较大且规律复杂，胚胎的培养密度对斑马鱼发育也有一定的影响。

因此实验采用单因素变量法，针对两个影响因素展开实验，分别设置27℃，28.5℃，32℃和35℃温度梯度和10个/ml，20个/ml，30个/ml，40个/ml，50个/ml和60个/ml密度梯度探寻温度、密度等因素如何影响斑马鱼胚胎发育。

经过实验验证了28.5℃为斑马鱼最适培养温度，同时也发现密度越高，斑马鱼死亡率越高，发育周期越长。

关键词：斑马鱼 胚胎发育 温度 密度 孵化率

The impact of temperature, density on embryonic development of zebra fish

Abstract

As a well-known model organism, zebra fish has been more and more widely used in scientific research, but with the increase of demand, intensive production has gradually expanded, and the problem of zebra fish embryo development has gradually become obvious. In order to solve this problem, experiments on influencing factors of zebra fish embryo development have been carried out in recent years. Zebra fish embryos have more influencing factors, such as temperature, PH, light, osmotic pressure and so on have been recorded in relevant literature. However, density has a great influence on zebra fish, and the regularity is complex, and the density of embryonic development also has a certain influence on zebra fish development.

The single factor variable method was used to investigate the effects of temperature and density on zebra fish.The temperature gradient of 27,28.5℃,32 and 35 and the density gradient of 10/ ml,20/ ml,30/ ml and 60/ ml gradient were set to explore the influence of temperature and density on zebra fish embryo development.

28.5℃ is the optimum culture temperature of zebra fish, and it is also found that the higher the density, the higher the mortality rate and the longer the development cycle.

Key Words: Zebra Fish; Embryonic Development; Temperature; Density; Incubation Rate

目录

摘要 I

Abstract II

第一章 文献综述 1

1.1. 斑马鱼简介 1

1.1.1. 斑马鱼的培育管理 1

1.1.2. 斑马鱼的优点 3

1.1.3. 斑马鱼应用 4

1.2. 温度、密度对于斑马鱼胚胎发育的影响 5

1.2.1. 温度对于斑马鱼胚胎发育的影响 5

1.2.2. 密度对于斑马鱼胚胎发育的影响 5

1.3. 其他因素对于斑马鱼胚胎发育的影响 6

1.3.1. PH值对于斑马鱼胚胎发育的影响 6

1.3.2. 光照对于斑马鱼胚胎发育的影响 6

1.3.3. 渗透压对于斑马鱼胚胎发育的影响 6

1.4. 本实验的研究内容 6

第二章 实验材料及方法 8

2.1. 实验仪器及材料 8

2.1.1. 实验仪器设备 8

2.1.2. 实验材料 8

2.2. 实验方法 9

2.2.1. 斑马鱼选育 9

2.2.2. 斑马鱼产卵 9

2.2.3. 斑马鱼胚胎筛选洗涤 9

2.2.4. 实验样品配备 9

2.2.5. 观察记录 10

2.3. 分析方法 10

2.3.1. 单因素变量法 10

2.3.2. 斑马鱼胚胎发育情况参数 11

第三章 实验结果与讨论 12

3.1. 温度、密度等因素对斑马鱼胚胎发育周期的影响 12

3.2. 温度、密度等因素对斑马鱼胚胎发育数的影响 16

第四章 结论 19

第五章 参考文献 20

第六章 致谢 22

文献综述

斑马鱼简介

斑马鱼是一种著名的热带淡水性观赏性鱼类，原产地为东南亚和南亚部分地区^[11]，以斑马样的条纹而取名。斑马鱼的躯体呈现纺锤状，成年之后体长能达到4～6cm。斑马鱼有着很强的性别区分度，雄性斑马鱼身体偏瘦，体色偏黄；雌性鱼身体肥大，体色偏蓝。斑马鱼的鳍部都呈现黄色，只不过雄性的颜色更深，它的条纹也更明显。孕期的雌性斑马鱼腹部有明显的的胀大现象，可以作为斑马鱼进入繁殖期的标志。斑马鱼与人类基因同源性高达百分之八十五，因而可以作为药物试验的模型，其也因而能成为著名的脊椎类动物疾病模型^[1]。

斑马鱼的培育管理

实验用斑马鱼一般饲养于室内恒温培养箱内，斑马鱼的繁殖用水要求pH6.5~7.5,硬度6~8，水温25~26℃，每天 9：00 及 16：00投喂商用配合饲料，投饲量标准为斑马鱼10 min 的食量。每两天吸污一次，并定时更换用水增氧。斑马鱼属卵生鱼类，受精后4个月左右便可繁殖产卵。繁殖前两周内，雌、雄亲鱼分置于不同培养箱喂养，此时采用活性饲料进行营养强化，活性饲料包括洄水、去壳卤虫卵及经聚维酮碘浸泡的红虫等^[15]。繁殖时先提前一天准备一个小型的繁殖箱，中间加入隔板，然后挑选适合繁殖的雌鱼和雄鱼分别放入隔板两边，一般要求是雌鱼与雄鱼之比为1:2。置于黑暗环境24h，次日上午即可撤下隔板，待鱼产完卵后将亲鱼捞出。斑马鱼最喜欢自食其卵，为了防止斑马鱼误食，网箱底部设置2mm的网孔，并且网层距离箱底10cm左右容纳沉积下来的受精卵。受精卵72h内就能长成幼体，幼体经过48h生长发育便可以在水里游动。此时的斑马鱼可以进食，开始时可以先用“洄水”喂养，一到两周后就可以改喂其他小型鱼虫。斑马鱼的每年有六到七周的产卵期，每次维持一周左右，每尾雌鱼每次可排卵300-800粒。

斑马鱼胚胎在发育过程中和普通鱼一样，从受精卵到出膜整个过程均在它的卵膜中进行^[20]。它发育的过程也是比较复杂的，当水温条件为28 ℃时，斑马鱼胚胎要历经7 个阶段——0～0.75 hpf（受精卵期），0.75～2.5 hpf (卵裂期)， 2.5～6.0 hpf(囊胚期)、 6～18 hpf(原肠胚期)、 18～32 hpf(体节期)、 32～46 hpf(咽部期)和 46～70hpf (孵化期) ，整个的胚胎发育历程大概需要 3 d 左右时间^[15]。

请支付后下载全文，论文总字数：14441字