重组大肠杆菌产葡聚糖蔗糖酶的酶学性质研究及催化合成葡聚糖的结构鉴定开题报告
2020-06-04 08:06
1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)
一、前言 葡聚糖具有安全,无毒及生物相容性好等优点,已经被广泛应用于医药,食品和色谱分析等方面[1]。
葡聚糖的主链中主要具有α-(1→6)连接的d-吡喃葡萄糖的细胞外细菌聚合物,并且可变量的α-(1→2),α-(1→3),α-(1→4)支链[2-4]。
葡聚糖是细菌多糖,可用作药物,特别是作为血浆容量膨胀剂.分子量为2万,4万和7万的临床级别的葡聚糖,是目前公认的血浆替代品[5]。
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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
本课题主要是对野生菌12291进行基因测序,找出生产葡聚糖蔗糖酶的基因序列,在体外利用pcr技术进行扩增得到可以产葡聚糖蔗糖酶的目的基因1438和496。
让目的基因和质粒相结合,然后将重组质粒导入大肠杆菌,即bl21感受态细胞,进行转化得到重组大肠杆菌,即目的细胞。
对目的细胞进行培养以产生稳定性好,易于纯化的葡聚糖蔗糖酶,然后用葡聚糖蔗糖酶和底物蔗糖反应,催化合成最终产物葡聚糖。
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