1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

巴斯德毕赤酵母的一个生物学特点是，甲醇代谢所需的醇氧化酶被分选到过氧化物酶体中，形成区域化。

以葡萄糖作碳源时，菌体中只有1个或很少几个小的过氧化物酶体，以甲醇作碳源时，过氧化物酶体几乎占到整个细胞体积的80%，aox增至细胞总蛋白的35%-40%。

因此，当在aox基因前利用同源重组方式插入外源蛋白基因时，可获得大量表达。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

本实验通过中试放大生产毕赤酵母甲醇蛋白以探究其发酵工艺并优化。

以菌浓及蛋白产量为标准,探究发酵生产流程，培养基成分，补料工艺并对其进行优化以获得较大的甲醇蛋白产出。

具体采用的手段： 1． 资料收集 （2016-01-15至2016-02-15） 2． 初步发酵工艺确定 （2016-02-16至2016-03-01） 3． 摇瓶培养 （2016-02-16至2016-03-01） 4． 种子培养 （2016-03-01至2016-03-20） 5． 1000l发酵培养 （2016-03-20至2016-04-20） 6． 10000l发酵培养 （2016-04-21至2016-03-01）