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定点突变法提高蛋白酶PT121催化合成Z-阿斯巴甜的效率研究开题报告

 2020-05-24 12:05  

1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)

一、蛋白酶研究概况 1.天然耐有机溶剂蛋白酶合成小肽 在水中的环境中,蛋白酶通常是催化水解肽键的断裂,但是很多实验结果表明,当但蛋白酶处于非水介质[1]中时,则向合成肽键的方向进行。

也就是说当有机溶剂在反应体系中存在时,则打破了肽键的水解平衡。

原则上讲,水解反应是可逆的,通过对在水解反应中产生的热量显示,当能保持产物在混合反应体系中的平衡浓度高于其在体系中的浓度的清除机制存在并产生作用时,水解反应产生热力学障碍,导致反应向肽键合成的方向进行。

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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

(1)研究思路: 本实验室开发的蛋白酶pt121在50%的dmso反应体系中高效合成阿斯巴甜前体z-l-asp-phenh2。

而合成阿斯巴甜的直接前体pheome时的效率较低,为此定向改造蛋白酶pt121,并开发出高效合成阿斯巴甜直接前体z-l-asp-pheome的方法将大大降低生产成本。

酶催化过程中存在底物抑制的现象,这不仅限制了催化体系中的底物浓度和反应速率还阻碍了工业化应用的可能性。

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