文献综述：

骨肉瘤（osteosarcoma）是起源于叶间组织的恶性肿瘤^[1]，也是恶性程度较高的骨的原发性肿瘤，其特点是瘤细胞直接形成骨样组织，故也称为成骨肉瘤。该瘤恶性程度甚高，预后极差，可于数月内出现肺部转移^[2]。发生在股骨下端及胫骨上端的骨肉瘤约占所有骨肉瘤的四分之三，其它处如肱骨、股骨上端、腓骨、脊椎、髂骨等亦可发生。骨肉瘤多数为溶骨性，也有少数为成骨性，肿瘤多处于骨端，偶发生于骨干或骨骺。肿瘤迅速生长是由于肿瘤经软骨阶段直接或间接形成肿瘤骨样组织和骨组织。下肢负重骨在外界因素（如病毒）的作用下，使细胞突变，可能与骨肉瘤形成有关。典型的骨肉瘤源于骨内，另一与此完全不同类型的是与骨皮质并列的骨肉瘤，源于骨外膜和附近的结缔组织，前者多见。

骨肉瘤转移是骨肉瘤难以治疗的最重要原因之一，当前研究表明，骨肉瘤细胞的转移与骨肉瘤细胞系中BMP9的内源性表达有关^[2]。同时通过抑制BMP9的表达可以促进骨肉瘤细胞的凋亡。也有研究表明，通过激活PI3/Akt信号通路从而部分导致了骨肉瘤细胞的转移^[3]，但是骨肉瘤细胞转移的具体机制尚不明确，目前针对骨肉瘤转移机制的研究各异，可能与磷脂酰肌醇-3-激酶（phosphatidylinositol 3kinase,PIk3)/Akt 和 wntβ-catcnin 信号通路有关^[4，5]。另外也有研究表明，细胞内活性氧水平与骨肉瘤细胞增殖有关，并且体内多个基因参与骨肉瘤细胞的表达^[6，7]。由于药物治疗的毒副作用大且对机体其他组织和器官可能造成损伤，在开发靶向治疗药物方面也有多研究^[8]，但目前对于骨靶向药物的研究尚未取得明显的进展。同时，骨肉瘤细胞多存在耐药性^[9]，往往导致单一药物治疗或某一药物长期治疗效果下降，故探索更多对抑制骨肉瘤细胞增殖转移有明显作用的药物并降低治疗骨肉瘤细胞疾病药物的毒副作用是目前研究的重要方向。同时需要对药物的作用机制进行深入研究，为开发更多药物的联合用药以及靶向用药提供广泛的研究思路。

当下用于骨肉瘤细胞转移治疗的药物种类较多，但是具有较好的长期疗效的却较少，主要是通过药物对机体的直接作用从而对作用机理的猜想与探讨， miR_30a抑制骨肉瘤细胞的研究^[2]表明miR_30a可以明显抑制骨肉瘤细胞的增殖与转移以及侵袭活力。双氢青蒿素（DHA)对骨肉瘤细胞的增殖也有明显影响^[6]，DHA具有较强的抗人骨肉瘤作用，主要通过抑制骨肉瘤细胞的增殖，促进其凋亡。淫羊藿素抗骨肉瘤的研究发现^[7]，淫羊藿素通过可能的机制和途径具有明显抗骨肉瘤作用，即淫羊藿素通过调控活性氧的水平来致使saos骨肉瘤细胞凋亡。其他药物和作用物的研究包括结缔组织生长因子、重组的人S1006A蛋白、MK2206、骨形态发生蛋白（BMP9）、白芦藜醇对骨肉瘤细胞U_2OS增殖和凋亡的影响等，均对骨肉瘤细胞具有一定的药理作用^[10]。在临床化疗药物方面的研究如NVP-BEZ235对骨肉瘤增殖和存活率的实验，NVP-BEZ235是一种双重ATP竞争性PI3K和mTOR的抑制剂，被证实对于抑制骨肉瘤细胞增殖有明显效果^[11]。单羧酸转运同型蛋白（MCT1）是MCT相关蛋白家族的重要成员之一，MCT1的下调可以明显抑制骨肉瘤细胞增殖，这可能是通过NF-kB途径实现^[12]。另外，双联苄类化合物Riccardin D 被证实可以通过激活细胞凋亡以及诱发细胞的自噬作用来促使骨肉瘤细胞的死亡，由此Riccardin D 也可以作为抗癌的候选药^[13] ，N-乙酰-5甲氧基色胺（melatonin)即褪黑激素，被证实同样可以抑制人骨肉瘤细胞的增殖，并且呈现时间与剂量依赖性，其作用机制与cyclin D1 ,CDK4,cyclin B1,CDK1的下调有关^[14]，与此类似的作用药物还有很多，除了天然药物成分也包括人工合成的药物，例如一种新的人工合成的小襞胺衍生物（bermamine)可以抑制细胞活性，通过与JNK/AP信号通路激活相联系诱导人骨肉瘤细胞的凋亡^[15] ，该研究中运用合成的BBM3作用于细胞发现其抑制作用也呈现时间与剂量依赖性，但是其具体机理也为详细揭示。针对目前诸多关于人骨肉瘤细胞抑制药的研究，虽然众多药物皆被证实对骨肉瘤细胞具有很好的抑制作用，但同时大多对体内正常细胞也有毒性，因而限制其临床的应用。因此开发更多具有疗效且毒副作用小的药物依然是当前研究的重点方向。

竹节香附素A 又名银莲花素（Raddeanin A），当前研究表明竹节香附素A具有明显的抗炎、抗肿瘤、解热镇痛等生物活性^[16]，这为对于竹节香附素A功能的进一步研究提供理论基础。竹节香附素A安全性好，毒性低^[17]，在人肝癌细胞对裸鼠的植入上已经得到验证，而把竹节香附素A运用于抑制人骨肉瘤细胞转移的研究较少。因此，本课题对于竹节香附素A抑制人骨肉瘤细胞转移的探讨也将很好补充对于竹节香附素A的功效的认识，同时对开发出治疗骨肉瘤细胞新药也有帮助。

基于当前研究已经揭晓的人骨肉瘤细胞增殖凋亡转移的可能机制以及多种药物的探讨^[18]，我们将竹节香附素运用于骨肉瘤细胞，并通过各种实验方法评价药物的作用效果。本研究以人骨肉瘤细胞MG-63为研究对象^[19]，以竹节香附素A对其进行诱导，考察药物的抗肿瘤效应，并通过特定的实验方法，考察药物对肿瘤细胞迁移和侵袭能力的影响。划痕实验评价药物干预后肿瘤细胞迁徙能力^[20]，最后通过实验数据与结果的分析，得出竹节香附素在对骨肉瘤细胞增殖转移中的作用，并且揭示骨肉瘤细胞转移可能的机制，为更多药物的开发提供理论依据。

参考文献：