新型羰基还原酶/醇脱氢酶的筛选开题报告

2020-06-10 10:06

1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

文献综述

1.1引言

醇脱氢酶(adhs， ec.1.1.1.1)，属于氧化还原酶的第一亚类，大部分醇脱氛酶以为辅酶进行电子转移，催化醇、酮或酸的氧化还原反应(图1-1)。它广泛存在于几乎所有动植物、微生物的细胞体内，参与各种特定的生理生化及代谢活动，催化脂酸、糖类、氨基酸、激素、辅因子、生物异生物质等的氧化还原代谢，是生命活动中不可或缺的关键酶之一^[1-3]。除了在胞内参与各种生命活动外，醇脱氢酶还在医药、农药、食品、化工等领域有重要的应用，特别是在生物催化领域，脱氢酶能有效地将前手性酮还原为对应的手性醇。手性醇是手性药物如培南类、他汀类、泛酸及阿托伐他汀类等药物合成中的重要中间体，也是生物活性物质合成反应中的重要媒介^[4,5]。传统的化学法合成手性醇对环境的污染大，生产成本高，而醇脱氢酶作为生物催化剂，有底物谱广、环境友好、立体选择性高等优势，在手性醇的生物酶法合成上具有很大的应用前景。

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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

一.本课题要研究或解决的问题：

利用所学的专业以及查阅有关醇脱氢酶筛选的资料、文献，收集必要的技术资料，根据各步反应的特点设计正确的反应方案。具体内容如下:

1.高通量筛选菌株方法的确定

2.实验室多种可能含醇脱氢酶菌株的培养

3.初筛高酶活菌株

4.复筛高酶活菌株,以确定最优菌株

5.优化醇脱氢酶催化反应条件

6.对醇脱氢酶酶学性质的初探

二.拟采用的研究手段（途径）：

利用所学的有机化学，生物化学以及查阅有关资料、文献，搜集必要的技术资料，采取逐步深入的筛选方法,筛选出高酶活最优菌株,如图2.1所示是一个三步筛选。

第一步：初蹄#8212;#8212;最普遍的筛选方法，如用底物初步富集，一般耗时短、操

作简便。利用这一方法在保证在没有丢失潜在阳性蹄选子的前提下，排除大部分

的阴性突变子。

第二步：复筛作为中间步骤底,要求底物特异性更强或者是半定量，如微孔板显色法。

第三步：特异性蹄选#8212;#8212;这一步骤相对耗时长但是更准确，一般包括HPLC、GC、分光光度或者是荧光定量等能较准确定量的方法。

图2.1 多重筛选体系示意图

毕业设计（论文）开题报告

指导教师意见：

1．对”文献综述”的评语：

2．对本课题的深度、广度及工作量的意见和对设计（论文）结果的预测：

指导教师：

年月日

所在专业审查意见：

负责人：

年月日

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