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摘 要

解淀粉芽孢杆菌是一种能够有效促进植株生长、增强植物的抗逆能力和抗病能力的根际促生菌。解淀粉芽孢杆菌还是一种生防芽孢杆菌，具有较广的抑菌谱，其代谢产物中的挥发性成分具有抑菌活性，对真菌、细菌、放线菌、病菌都有具有较强的抑制作用。在生物农药、食品、保健品、饲料添加剂、生物医药以及化妆品等领域有着巨大的应用潜力。

本文以实验室保存的解淀粉芽孢杆菌NX-2S为研究对象，并对其进行了一系列的生物学特性分析，对该菌培养后进行了菌落特征的观察，完成了生长曲线以及标准曲线的测定工作。为了延长制剂的保质期，应用加速实验，以解淀粉芽孢杆菌产生的聚谷氨酸以及添加的糖蜜为保护剂，来观察其是否能够延长制剂保质期。最后为了能够确保试验结论的可靠性，要对实验结果展开验证试验。

关键词：解淀粉芽孢杆菌 聚谷氨酸 生长曲线 标准曲线 糖蜜 保护剂 保质期

Preparation and Characterization of Polyglutamic Acid Microbial Agent Microcapsules

Abstract

Bacillus amyloliquefaciens is a rhizosphere growth-promoting bacterium that can effectively promote plant growth and enhance the plant's stress resistance and disease resistance. Bacillus amyloliquefaciens is also a kind of biocontrol bacillus, which has a broad antibacterial spectrum. The volatile components in its metabolites have antibacterial activity, and have strong inhibition on fungi, bacteria, actinomycetes, and pathogens. effect. It has huge application potential in the fields of biological pesticides, food, health care products, feed additives, biomedicine and cosmetics.

In this paper, the Bacillus amyloliquefaciens NX-2S stored in the laboratory was taken as the research object, and a series of biological characteristics were analyzed. The colony characteristics were observed after the cultivation of the bacteria, and the growth curve and the standard curve were completed. Determination work. In order to prolong the shelf life of the formulation, an accelerated experiment should be used, with polyglutamic acid produced by Bacillus amyloliquefaciens and added molasses as the protective agent to observe whether it can extend the shelf life of the formulation. Finally, in order to ensure the reliability of the test conclusion, a verification test must be carried out on the experimental results.

Key Words:Bacillus amyloliquefaciens;Polyglutamic acid;Growth curve;Molasses;Standard curve;Protective agent;Shelf life

目 录

摘 要 I

Abstract II

第一章 绪论 1

1.1研究微生物菌剂的意义 1

1.2微生物菌剂 1

1.3解淀粉芽孢杆菌 2

1.4微胶囊技术 2

1.5聚谷氨酸 3

第二章 实验材料与方法 4

2.1实验材料 4

2.1.1实验设备 4

2.1.2 主要试剂 4

2.1.3 培养基和溶液 4

2.2 解淀粉芽孢杆菌的纯化和菌落形态观察 5

2.2.1解淀粉芽孢杆菌NX-2S的纯化 5

2.2.2解淀粉芽孢杆菌NX-2S菌体形态观察 5

2.3解淀粉芽孢杆菌NX-2S生长曲线的绘制 6

2.4解淀粉芽孢杆菌NX-2S标准曲线的绘制 6

2.4.1种子液的制备及浓度测定 6

2.4.2解淀粉芽孢杆菌NX-2S标准曲线的测定 6

2.5解淀粉芽孢杆菌NX-2S 的保质期研究 7

2.5.1解淀粉芽孢杆菌NX-2S制剂的制备及浓度测定 7

2.5.2保质期测定方法 7

2.5.3验证性实验 8

第三章 实验结果与讨论 9

3.1 解淀粉芽孢杆菌NX-2S形态观察结果 9

3.2芽孢杆菌NX-2S生长曲线的绘制 9

3.3芽孢杆菌NX-2S生长曲线的绘制 10

3.4解淀粉芽孢杆菌保质期的测定 11

第四章 结论与展望 13

参考文献 14

致谢 16

第一章 绪论

1.1研究微生物菌剂的意义

人类从很早前就会使用微生物，如使用益生菌发酵牛奶，酵母菌发面。到了当代，人们已经意识到大量使用化学肥料农药的危害。甚至在对世界各地的水果软饮料中的检测中都发现了较高浓度的农药残留^[1]。施肥对作物生产力和农田土壤碳储量的影响一直是可持续农业和全球变化研究的重点，现代农业中大量使用化肥无论是有机肥料还是无机肥料，如果管理不善，都会导致植物养分利用效率低下，导致农民利润损失，对环境造成潜在损害，由于养分保留能力低，导致作物产量低，对地表水和地下水造成的广泛污染，从农业用地流出的水还常常含有化肥和农药等农用化学品，这些化学品对淡水生态系统有各种影响，包括使藻类和一些硅藻物种的死亡、抑制光合作用，导致原生动物异养活性的增加以及生物多样性的改变，对生态系统造成破坏^[2]。随着施氮量的增加，土壤的pH、脱氢酶、脲酶和中性磷酸酶活性、硝化能力和微生物功能多样性显著降低^[3]。土壤微生物在土壤养分循环中起着重要作用，特别是在氮素转化中。保持土壤健康和质量的土壤微生物多样性是如此重要。因此我们急需寻找一些有效的、环境友好的新型替代品。微生物菌剂在蔬菜、水果等作物增产，治理重金属污染治理方面很有研究潜力 ^[4]。在加拿大，由于人们要求各级政府减少在食品和环境中使用的农药数量，他们的农药使用模式发生了变化。政府通过实施立法改革，以及制定新的政策和管理结构，实施有关减少农药战略的方案，并为废除的虫害控制方法制定替代战略。政府支持对于新药的研究，以将科研团队的研究成果快速的投入到工业生产当中。所有这些因素加在一起创造了加拿大生物农药发展的强劲势头。这些情况并非加拿大独有，世界上的许多国家也在以不同的速度进行着改革。公众和政治态度的变化以及对研究的投资使得加拿大寻找到了减少农药的解决办法，并接受生物农药作为一种安全可靠的替代方法。

1.2微生物菌剂

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