1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

文 献 综 述

1. 选题背景

磷脂酶d的转磷脂酰反应是合成自然界稀有的、高附加值磷脂化合物的最有效途径，这类磷脂化合物是药品，化妆品和食品行业的重要原料，因此磷脂酶大规模工业化生产磷脂酶d一直是迫待解决的问题。
2.磷脂酶d的简介
磷脂酶，在生物体内存在的可以水解甘油磷脂的一类酶，其中包括磷脂酶a1、a2、c和d，在动植物内广泛存在。其中主要包括磷脂酶a1、a2、b、c和d，它们特异地作用于磷脂分子内部的各个酯键，形成不同的产物。这一过程也是甘油磷脂的改造加工过程。
3.磷脂酶d的催化作用
广泛存在于自然界的磷脂酶，在生物过程和生理功能，包括细胞信号传递中扮演了重要角色。磷脂酶是磷脂酶超级家族中的一员，最早在植物中发现，对特殊磷脂表现了磷酸二酯酶活性，这类酶包括心磷脂合成酶，磷脂合成酶，痘病毒包膜蛋白，耶尔森氏小鼠毒素，和几种核酸内切酶。
磷脂酶作为磷酸二酯酶超家族中的一员，是催化磷脂水解第一步反应的关键酶之一，它是一类重要的跨膜信号转导酶类，属于胞外酶，分别由一个基因家族的不同成员编码，广泛存在于微生物，植物和动物中。不仅可以水解磷脂酰胆碱生成胆碱和磷脂酸，也可以催化转磷脂反应，将脂链上伯醇的羟基转移到磷脂酸产物的磷脂酰部分。在哺乳动物中，通过生物化学和细胞生物学方法已确定磷脂酸作为中间体，在胞外信号的传导中发挥重要作用。磷脂酸或其代谢物可能是关键细胞代谢的调控者，如细胞内蛋白质的转运，分泌和细胞形态的改变，运动。
近年来，研究工作者使用了大量的蛋白质工程方法和细胞质基因组表面回声分析来研究磷脂的催化反应机制，底物识别，底物特征和稳定性。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

本课题以来源于s.pmf的磷脂酶d基因为模板，通过分子手段导入大肠杆菌bl21de3，使其能够表达产生磷脂酶d。

目前磷脂酶d的检测方法主要是试剂盒，本实验使用大肠杆菌表达的磷脂酶d催化反应生成磷脂酰丝氨酸，通过测定产物的量来确定磷脂酶d的酶活大小。

拟解决的问题：