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摘 要

发芽糙米是指糙米经过浸泡发芽到适当芽长，一种有糠层、胚芽及胚乳组成的糙米制品。糙米经过发芽后，不仅口感得到改善，而且糙米内的营养成分及功能因子也大大的富积，尤其是其中的γ-氨基丁酸，和没有经过发芽的糙米及精白米相比，含量增幅明显。

HPLC-UV检测发芽糙米中γ-氨基丁酸。色谱条件：色谱柱Speax BR C-18柱（4.6mmx150mm,5μm）；流动相A为25mmol/L的乙酸钠，；流动相B为纯乙腈，样品pH值9.8，检测波长是216 nm;流速为1mL/min,进样量20μL，柱温30℃用标准样品工作液所测得线性方程Y=9400.6659 24399.45X，相关系数为R²=0.99953。样品平均回收率94.17%，精密度高，操作简单，时间短，检测限低，重现性好。

关键词： 发芽糙米；γ-氨基丁酸；丹磺酰氯；HPLC；柱前衍生

Determination of γ-amino butyric in the germinated brown rice

abstract

Germinated brown rice after soaking germination refers to the appropriate bud A layer of bran, germ and endosperm of brown rice products. After germinating brown rice, not only to improve the taste and nutritional content of rice and functional factors also greatly within enrichment, in particular the γ- aminobutyric acid, and has not been germinated brown rice and polished rice compared to content increase significantly .

HPLC-UV detection γ- aminobutyric acid germinated brown rice. Chromatographic conditions: Column Speax BR C18 column (4.6mmx150mm, 5μm); mobile phase A was 25mmol / L sodium acetate, and; mobile phase B was pure acetonitrile, sample PH value of 9.8, the detection wavelength is 216 nm; flow rate of 1mL / min, injection volume 20μL, column temperature of 30 ℃ working solution with a standard sample measured linear equation y = 9400.6659 24399.45X, correlation coefficient R2 = 0.99953. Average recovery 94.17%, high precision, simple operation, short time, low detection limit, good reproducibility.

Key Words: germination brown rice;γ-aminobutyric acid;Dansyl-Cl;high performance liquid chromatography;precolumn derivatization

目录

摘要 I

abstract II

第一章 绪 论 1

1.1引言 1

1.2发芽糙米的研究现状 1

1.2.1糙米发芽工艺 1

1.2.2发芽糙米的营养 1

1.3 GABA的含量检测 2

1.3.1比色法 2

1.3.2改良纸层析法 2

1.3.3液相色谱法 2

1.4衍生试剂 3

1.4.1芴甲氧羰酰氯（FMOC） 3

1.4.2邻苯二甲醛（OPA） 3

1.4.3 2,4-二硝基氟苯（FDNB） 3

1.4.4 6-氨基喹啉基-Ｎ-羟基琥珀酰亚胺氨基甲酸酯(AQC) 3

1.4.5 丹磺酰氯 3

1.5发芽糙米中GABA的提取 3

1.5.1涡旋提取 3

1.5.2回流提取 3

1.5.3水浴震荡提取 4

1.5.4超声提取 4

1.5.5小结 4

1.6研究目的与意义 4

第二章 HPLC法测定发芽糙米中γ-氨基丁酸的含量 5

2.1材料和方法 5

2.1.1仪器与试剂 5

2.1.2色谱条件 5

2.1.3高效液相色谱的相关概念简述 6

2.1.4色谱条件选择的依据及HPLC的操作 6

2.1.5标准溶液的制备 6

2.1.6发芽糙米样品GABA的提取 6

2.1.7衍生试剂的制备及衍生化反应 7

第三章 结果与分析 8

3.1数据分析 8

3.2最大吸收波长的确定 8

3.3标准曲线的制备 9

3.4精密度实验 10

3.5稳定性试验 10

3.6回收率实验 10

3.7样品测定结果 11

第四章 总结与展望 12

致谢 13

参考文献 14

绪 论

1.1引言

发芽糙米是糙米经过发芽酶解后所得到的产品，具有很高的营养成分及研究价值，也是一种很好的医疗保健食品，γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid，GABA），作为哺乳动物身体体内重要的组成部分，有很多的生理功能及不可替代性。目前，由于糙米发芽后其中的γ-氨基丁酸的含量有大幅度增加，故用糙米发芽以得到更多的GABA，已成为食品深加工中至关重要的一部分。也是目前各个国家目前研究的重点项目^[1]。

GABA的化学名叫4-氨基丁酸，分子式NH₂CH₂CH₂CH₂COOH，它的分子量是103.1。是一类常见的非蛋白质氨基酸，是目前研究较多的一种重要抑制性神经递质，这种抑制性神经递质也存在于“哺乳动物、昆虫和一些寄生蠕虫、甲壳类动物中，参与动植物体内很多生理代谢过程。现代医学已经能够证明，GABA具有增加脑供量，活化肾功能，预防肥胖、减少脂肪，加快细胞代谢、活化脑血流动速度的功能，对于高血压病人，还具有降血压等生理功能^[2-3]。

由于GABA在紫外及可见光区的吸收灵敏度很低，故一些常规的方法检测很难做到精确的检测，目前，国内外主要测定GABA含量的方法有氨基酸快速分析法、毛细管电泳法、分光光度法及高效液相色谱法^[3-4]。当前柱前衍生高效液相色谱法用的最多，就是在样品进样前，对样品进行衍生化的处理，加上灵敏度很高的生色团，当前使用较多的衍生方法，有AQC法（6-氨基喹啉基-Ｎ-羟基琥珀酰亚胺氨基甲酸酯）、DNFB法（2,4-二硝基氟苯）、OPA（邻苯二甲醛）、DNS法（丹磺酰氯）等^[5]。

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