1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

文 献 综 述

1.1 水产品的营养价值

水产品种类繁多，包括鱼类、贝类、藻类和虾蟹类等，是一种营养价值非常均衡的食物。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

研究或解决的问题：

(1) 对市场上的103份水产品进行DNA提取；

(2) DNA条形码和mini-DNA条形码的扩增；

(3) 序列分析及物种鉴定；

采用的研究途径：

（1） DNA的提取

取约200mg肌肉组织于2ml圆底离心管中，加入200micro;l 组织裂解液（500 mM Tris-HCl pH 8.0, 100 mM EDTA, 100 mM NaCl, 2% SDS）和200micro;l磷酸盐缓冲液（300 mM pH 8.0），用无菌手术剪刀将肌肉组织剪碎。再向该离心管中加入20micro;l蛋白酶K（20mg/ml），并将离心管置于65℃恒温水浴锅裂解60min。裂解结束后，14000g离心5min，吸取上清液并转入新的2ml圆底离心管。加入0.5倍体积的乙酸钠溶液（4M, pH 8.0），振荡混匀，14000g离心5min，吸取上清液并转入新的2ml圆底离心管。再加入0.5倍体积的乙酸钠溶液，振荡混匀，14000g离心5min，吸取上清液并转入新的1.5ml尖底离心管。加入0.6倍体积的异丙醇，振荡混匀，静置5min后14000g离心10min，弃去上清液。加入800micro;l 70% 乙醇，振荡混匀，14000g离心3min。弃去上清液，再加入800micro;l 100%乙醇，振荡混匀，14000g离心3min，弃去上清。75℃烘箱烘干后加入30micro;l 灭菌超纯水溶解DNA，并置于-20℃贮藏。DNA的浓度和纯度（A_260nm/A_230nm和A_260nm/A_280nm）用核酸蛋白测定仪测定，并稀释至100ng/micro;l备用。DNA的完整性通过1%琼脂糖凝胶电泳检测。

（2）通用引物扩增DNA条形码和mini-DNA条形码；

表1 DNA条形码和mini-DNA条形码通用引物