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毕业论文网 > 开题报告 > 化学化工与生命科学类 > 生物工程 > 正文

谷氨酸棒杆菌草酰乙酸节点和α-酮戊二酸节点的代谢途径改造对合成L-鸟氨酸的影响开题报告

 2020-07-06 06:07  

1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)

文 献 综 述 1谷氨酸棒杆菌中l-鸟氨酸合成途径 谷氨酸棒杆菌是由日本科学家在筛选l-谷氨酸生产菌株的时候在土壤中发现的一种棒状、革兰氏阳性、非病原性细菌。

随后谷氨酸棒杆菌被广泛的应用于l-谷氨酸(l-glutamate, glu)、l-苏氨酸(l-threonine, thr)、l-赖氨酸(l-lysine, lys)、l-精氨酸(l-arginine, arg)等氨基酸的生产。

随着谷氨酸棒杆菌全基因组测序工作的完成,利用代谢途径改造来提高菌株的生产力,已经成为一种普遍的手段。

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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

1.本课题要研究或解决的问题 本课题以实验室前期所研究得到的L-鸟氨酸生产菌为基础,拟对L-鸟氨酸合成的关键前体草酰乙酸和α-酮戊二酸展开研究,通过对其代谢及回补途径关键节点基因的表达及敲除,分析增加草酰乙酸和α-酮戊二酸的积累对提高L-鸟氨酸合成的影响。

2.拟采用的研究手段 在查阅相关文献的基础上,以实验室前期研究得到的可合成L-鸟氨酸的谷氨酸棒杆菌为出发菌株,为了考察草酰乙酸和α-酮戊二酸供应对L-鸟氨酸产量的影响,对代谢节点进行改造,具体包括过表达草酰乙酸合成关键酶磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶PEPC,过表达α-酮戊二酸脱氢酶复合体ODHC抑制蛋白OdhI,并对重组菌进行摇瓶发酵,考察氨基酸产物和相关酶活的变化。

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