1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

丙酮酸氧化酶(ec1.2.3.3)是以焦磷酸硫胺素(thdp)为辅因子，因此被称作焦磷酸硫胺素依赖酶。

焦磷酸硫胺素(thdp)依赖酶存在于各种生物中，参与多种代谢反应。

根据其催化反应机理，thdp依赖酶可分为五类，都以其代表性的酶命名f4s1。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

本实验研究的酶试剂#8212;丙酮酸氧化酶，其基因来源于实验室已准备细胞，首先对丙酮酸氧化酶基因序列进行优化，利用分子改造技术对蛋白肤链结构进行了改造，利于重组酶后续分离纯化。

并以此为模板，设计特异性引物，经PCR扩增目的基因片段，回收PCR产物，构建载体，经酶切、连接、转化，并在大肠杆菌中成功表达。